深入了解寡核苷酸固相合成的那些技术（二）MCE直播回放原创

然后呃，前面有提到目前的这个基因治疗这方面呢，嗯，有很多寡核苷酸药物，呃，得到了一些。上市，然后大家对寡核酸药物呢，也也有一定的了解，它它是呃，这些药物呢，因为是在体内的一个。使用需要对它的对寡核苷酸本身的一个稳定性，还有它的免疫原性有更高的一个要求哦，需要改善这些寡核苷酸的腰带动力学特性，然后由此呢，就发展出了一些呃，特殊化学修饰的。寡核苷酸。我们就来看一下这些不同的，呃，化学修饰。这同样是一个呃核苷，核苷酸单体的结构示意图，这些呃化学修饰呢，也主要是在它的这个不同，这几个不同的部位。发生的。主要是在磷酸。

那五碳糖以及碱基上。像在磷酸，嗯，这个位置呢，一般是流带。就是说这个磷酸基团当中的一个氧会被硫原子给取代掉。然后像五碳糖上有这里，呃，它的羟基可以被这个氟或者被假氧机，或者是甲氧基乙基给所取代。荷塘上的这个二撇位置啊，发生的取代。然后还有一些构象受限的核苷类似物。想可以看一下这个示意图啊，形成的这种形成的这种桥接。调节策略，然后产生的。CT或者是核酸。然后也有一些是呃，使用了特殊的这种，嗯，核苷的类似物变变体，像这里PP na和p mopna的话，它就是使用了就是钛钛合酸，它使用了这个肽链的一个骨架结构。

然后在他的策略上。是碱基，然后碱基仍然是能够和这个，呃，我们的靶基因去结合的。P猫与它的这个结构也也是类似的。然后还有碱基上的修饰，碱基的上的修饰也比较多样，最常见的话就是这个甲基化。还有比如假尿苷。这个在MRA的合成当中也有所应用。这些修饰是可以啊，降低啊免疫原性，或者是提高它的热稳定性。这里就总结了几种不同的这个修饰，它带来的一些优缺点。像一般是可以提高呃核酸酶的抗性，还可以增加呃一些就是和靶基因的亲和力。

不过有一些这个修饰呢，也可能会带来一定的毒副作用。所以在呃，真正的寡甘酸药物开发过程当中呢，是会采用多种不同的化学修饰组合，然后来达到一个最佳的。啊，治疗效果。下面来看两个例子。啊，第一个呢，是这个。呃，英克斯兰娜。这款药物呢，它是用于治疗像高胆固醇或者是高血脂症。这个是它的序列的一个示意图，我们可以看到它采用的化学修饰呢啊，像也包括前面提到的啊o me, 还有福袋。还有留贷。这些。

不同的颜色代表了不同的修饰，然后除此之外呢，它还有一个这个在末端，在反应链上的末端有一个偶联啊，安一酰半乳糖氨三三，具体的。这个。修饰。啊，之所以会做这种修饰呢，是因为氨酰半乳糖胺，它是呃脱脱盐酸糖蛋白这个配它的一个配体。而脱脱液呃脱唾液酸糖蛋白呢，它主要是表达在肝细胞上。所以做了这个。呃，A线半乳糖氨这个偶联的SRA呢，它是，呃，可以实现一个肝脏的靶向性。而那个像高血脂，高胆固醇，它主要的一个相关疾病器官的话，就是就是肝脏，所以能够让这个核酸药物呢。

啊，直达这个，呃，发生疾病的器官，实现更好的一个治疗。所以与肝脏相啊相关的一些疾病，它相相关的这个呃，寡甘酸药物呢，通常都会去做。这种嗯莲这种安一些半糖胺。啊，就看一下这个第二个例子。派克帕尼娜。这个呃，这款药物呢，它是一个呃核酸适配体。可以看一下，这是它的序列，然后以及它的一个。结构是。他同样也做了像o me还有福袋。附带的修饰，嗯，还他还做了一个比较特殊的藕莲，就是这个。P9连40KD就是4万的分子量的一个PG的OM。

这个PEG分子呢？它可以去延长这个核酸药物。它的。半衰期使它在呃体内呢可以停留更长的一个时间，同时也能够降低呃这个寡核苷酸，它相应的一个免疫源性，减少相应的毒副作用。目前也有几款这种，嗯，寡格酸药物是采取这种偶联PEG的方式来改善它的啊，药代动力学特性。啊，最后呢，我来介绍一下啊MCE提供的寡甘酸定制服务。我们MCE呢，是有一个呃，专业的寡甘酸合成平台，我们有，嗯，比较有经验的，相应的研发人员也配备有比较先进的这个设备仪器啊，能够提供像前面提到的不同类型的一个寡甘酸的合成，像这个反应寡氨酸SRA。

啊，Micro I等，还有一些核酸探针，这些我们都可以去合成，然后哦，对于一些呃，复杂的化学修饰啊，修饰的寡核苷酸呢，我们也可以提供，就前面提到的像什么附带。啊o me或者moe锁核酸这种寡核苷酸，我们也能够去进行，我们客户他根据他的需求去合成。此外，比如一些特特殊的这种寡核苷酸与小分子或者多肽的，甚至是抗体的一些O列，我们也可以进行相应的一个评估，根据这个多肽或者抗体它的一个序列啊。来评估是否能够进行偶联，此外呢，也可以去做一些偶联，像呃，Link可比如一些。

啊，反应接头像迭氮，嗯马来险亚胺或者是什么球基啊HS纸这种，嗯这种接头，嗯去偶联，然后偶联的这种接头的寡核苷酸呢，是可以去和呃带有另一个接头的，其他的一些像。呃，化合物啊，或者是多肽去发生反应的。然后我们的一个合成流程的话也是，呃，采用固相合成的方法啊，使用这个啊亚磷酰胺单体，然后经过固相合成，嗯，得到一个粗产品。然后再使用HPLC纯化的方法将粗产品提纯啊。对于一些特定的呃，需求量比较大的，或者是用于动物实验的寡核苷酸呢，我们会进行相应的拖延，最后将这个寡核苷酸冻干，形成一个冻冻干粉，然后提供给客户。

这个是我们寡甘酸的一个合成案例，然后合成一个DNA序列，是一个比较简单的DNA，没有做修饰。然后这个是我们常见的一些呃，固相合成合成实验的条件。我们在合成了这个嗯，DNA的粗产品之后呢，我们会对它的分子量进行一个鉴定。像刚刚这个DNA序列，它的分子量呢，就是这个中间这个6037。然后呃，由于固项合同当中会产生一些杂质链，在前面我们有提到，比如说一些N-1或者N+1的杂志链啊，通过这个质谱呢，我们就能够区分出他们。

然后我们的呃，使用这个HPLC呢进行纯化，就是只保留我们的这个目的序列，像杂志序列呢，会被去除掉。然后我们得到的这个目的序列呢，它的纯度就可以达到90%以上，一般我们可以做到95%左右。像这里两个批次的一个。寡钙酸呢，都是达到了纯度在95%以上。啊，最后呢，我来总结一下我们，嗯，MC提供的这个挂号安全服务。我们可以根据就是客户的一个需求去为你定制合成寡甘酸，像一些常见的化学修饰，在比如在那个寡甘酸的碱基或者核糖，或者是骨架上的不同类型的修饰，我们都是可以提供的，然后像一些特殊的呃藕莲。

比如说多肽和抗体的话，我们可以为您进行相应的一个评估，因为这涉及到一个偶联技术，然后还可以去做一些像啊末端的一个修饰啊，比如一些荧光集团。荧光标记的这种寡核苷酸，像常见的f Fi TC.FM或者是CY3、CY7这些荧光染料。去偶连到寡核苷酸上。然后也可以去在寡甘酸的末端去加一些呃反应接头，嗯，以供您下一步自己去呃做一些化学反应，比如这个简单球基。马来西亚胺这些常见的反应接头。然后我们提供的寡核苷酸呢，它的含量我们是通过紫外的方法去进行一个定量，确保这个核酸含量。

然后相应的这个寡氨酸产品，我们我们的纯度啊，是通过这个HPLC的方法纯化，是可以保证达到嗯，您需要的这个程度啊，像内毒素检测的话，我们也可以啊，进行相应的一个检测。啊，我的介绍啊，到这里就结束了。啊，下面把呃这个话筒交给我们的主持人。好的，感谢我们王老师的精彩分享，真让人受益匪浅。接下来到我们小M的时间了，各位小伙伴们，MC呢多年以来一直致力于生物活性分子的研究，服务于全球的生物医学研究以及药物发现领域的优质顶尖客户，其优秀的科研成果已经发表在包括CNS在内的43000篇的生物医药、生物医学和新药研发的科研文献中，那在全球范围内的MC也是拥有了超过6000家的合作伙伴，包括世界知名的医药企业和顶尖的高效科研机构。我们MC呢也是深度布局多个产品线，不仅有活性小分子蛋白、大分子多肽试剂盒等常规产品，也包含ADC protect等特色产品和专门的专业的定制服务，可以根据您的需求为您的科研提供一站式的药物筛选服务呢，听到这里，小伙伴们是不是已经抑制不住自己想做实验的小手了。MC将祝您。

一起攀登实验高峰，那我看我们评论区的小伙伴对本次的讨论也是分享，讨论也是热火朝天的，那我们话不多说，开启咱们的答疑环节，并开启我们最后一轮的抽奖。相信认真的小伙伴已经发现了，我们直播间周围是不是已经摆满了我们的周边，还有我们的实验产品，非常的精美也可爱，特此呢，小M为努力听讲的萌家人准备了20份的精美的MC礼包，想要参与抽奖呢？必须要在评论区提出与本次分享主题相关的问题，如果您是无效评论，我们是会取消您的中奖资格的。本次抽奖呢，一共有20个名额，我们5分钟倒计时，如果啊您是无效评论可不可就是不可以的哦，那我们一定要多多互动，不仅能答疑解惑，还有机会赢取大奖，那我们在此有请王老师来呃闪亮登场，和我们一起来答疑吧。

嗯，我看有小伙伴们，有小伙伴们MC可以提供溶液包装的寡寡核苷酸吗？啊，一般我们是提供的是冻干粉形式的，因为溶液形式的寡甘酸呢，它可能嗯。稳定性会比较差一点，保存时间比较短，我们一般不提供溶液形式的，我们建议您是拿到我们的这个冻干粉形式的产品之后呢，根据情况，如果您近期需要实验，您可以把它就是使用像一些呃无菌水或者无核酸梅水去溶解掉，然后作为一个母液去保存。

好的，那也有小伙伴们，你们提供的预实验SIRA套套装可以用于动物实验吗？啊，这个的话，我们预设计的SR套装呢，我们建议您是用于细胞实验，像动物实验呢，因为给动物实验它的动物动物体内呢，是这个环境比较复杂啊，然后对于这个SRA它的稳定性啊也有比较高的要求，所以啊我们的这个B设计的套装，它没有做相应的一个化学修饰，可能稳定性上没有那么好，就不是不是很适合动物实验啊，如果您需要这种用于动物实验的SRA的话，是可以联系我们去定制的，我们是可以帮您去推荐适合于呃动物实验的一些特定化学修饰，因为您一般动物实验需要的SRA的合成量呢也比较多，然后我们的定制合成的是可以帮您合成大量的这个呃SRA。

好的，感谢王老师，那我们下一个问题是想问一下带修饰的干粉是怎么保存的呢？啊，带修饰的干粉啊，这个具体要看您是呃带什么修饰。如果你是带荧光集团的这种的话，呃，需要注意避光，然后就是干粉的话，它比较容易吸潮，还有你保存的时候要注意防潮，比如说你的管子最好用封口膜封上，或者是呃在-20的或者-80里保存。然后如果您的修饰是一些其他类型的修饰的话啊，比如说就是我们前面提到的什么福带啊，或者是啊留带啊这些修饰的话，它其实呃可以不去做避光，它和普通的干粉的保存呢，是差不多的。

好的，那我们下一个问题是，适配体是怎样合成的呢？适配体，呃，我们目前提供的适配体呢，呃，主要是有一些是文献报道的，还有像一些嗯，核酸，核酸适配体药物，嗯，如果你是需要去。呃，一些去设计适配体的话，它的这个就比较复杂了，合成的话，它它的合成技术和其他像SRA，呃，或者是麦克I其实是一样的，也是固固相合成的一个方法，只是说适配体它的序列长度会更长啊，更长的话，它这个合成的这个呃。就是我们前面提到的互相合成当中，它可能出现呃，一些杂志片段的概率会更高，相对来说合成的难度会比SR会更高一点，嗯，然后它的价格相对如果序列更长也会更贵一点，只是只是这个区别，那合成技术还是采用的是互相合成的技术。

好的，那我们下一个问题是有小伙伴问，你们是否能够提供全金合成服务呢？啊，全基因合成的话，这个它一般提供的可能就是一些直立去进行。啊中产品是直立，和我们这个呃，固相合成，前面有说过，它是化学合成的方法啊，还是不太一样，所以我们暂时不提供全基因合成的服务。好的，那我们下一个问题是，呃，我们定制的话是可以提供多长的核寡核苷酸呢。啊，一般的寡苷酸最长的话，我们大概是可以提供呃，200个核苷酸左右的一个长度。

好的，那现在，嗯，现在的工艺流程无法合成AC4C这样的酰基化修饰吗？啊，这个呃AC4C啊，之前是有也有碰到有客户咨询这个，呃这种特殊修饰的很比较少见的修饰，这种呢，其实主要还是呃原料的一个问题，呃比较难以找到这个相应的，呃这种AC4C这个修饰的特定。亚磷酰胺单体，因为呃，前面我们提到它是它它必须用这种亚磷酰胺单体去反应啊，所以这个做需要去定制相应的这个原料是比较困难的。所以暂时这个ACC4C的这种修饰的我们还没有做过，因为原料比较难找。那目前寡核苷酸在炎症方面的研究多吗？能举一个类似的药物介绍吗？

炎症方面啊。甘酸其实它是一个工具，在炎症方面的话啊。您是可以针对比如说参与炎症的一些呃基因去设计相应的寡核苷酸，这个的话，嗯，应该是有的，但是我目前没有没有案例可以介绍给你，可能需要查一些资料。好的，那我们这个问题后续也是可以在我们官网上可以再咨询一下哈，嗯，那我们下一个问题是，嗯，MC这边可以提供荧光团标记的寡核苷酸吗？啊，这个是可以的，荧光标记的一些探针啊，啊，只要您提供嗯它的一个序列，然后告诉我们你想去呃连接什么荧光集团，然后呃，我们就可以帮您去呃做相应的这个荧光标记的寡核苷酸。好的，那我看也许有小伙伴是问一些这个合成服务方面的问题，那我们这边可以联系我们的MC销售进行一些服务上的咨询哈，那下一个问题是有小伙伴问，如果我需要定制寡核苷酸，需要提供哪些信息给你们呢？

啊，如果是定制的话啊，一般您需要提供寡甘酸的序列啊，然后呃，你需要合成多少量，嗯，最后还有就是您需不需要做化学修饰，如果您要做化学修饰，需要告诉我们您的修饰类型是什么样的，在哪个位置上啊，如果不需要做化学修饰的话，那就可以不用啊介绍这方面就直接提供序列，还有你的合成量就好。好，那我看有小伙伴们问这个关于干粉溶解的问题，有一个问说干粉溶解后需要分装保存，不能反复动容，对吗？还有一个问题是，呃，溶解后必须用玻璃瓶装吗？可以用离心管装吗？啊这个干粉嗯嗯，一般是建议你把它分装成啊个小份，然后保存，因为寡甘酸如果是反复动容的话，也会呃影响它的一个稳定性，有可能在反复动容的过程中会有一部分嗯，这个核酸列降解掉。

嗯，是否必须用玻璃瓶呢？其实可以啊，不一定非要用玻璃瓶，用离心管也是可以的。如何学会代表？嗯，还有小伙小伙伴问荧光团标记的寡和苷酸服务荧光团有多少种选择呢？荧光呃，荧光团的话，其实基本常见的荧光集团都是可以的。我们我们目前的银光集团，嗯，就是常见的那些类型哦。啊，像那个CY3系列的，然后Fi TC绿色荧光，还有红色荧光，嗯，这些都是可以做的。

那那下一个问题是我们这边可以定制多长的寡核干酸，回答过啊，已经回答过了，那我们下一个问题是不同修饰用不同的物质溶解不一样吗？需要分装吗？哦哦，这个如果你的这个寡甘酸是做过修饰的啊，并不是说一定要用不同物质啊，溶解主要看你的实验需求，比如说如果您是做细胞实验，你可能会用，嗯，比如说购买的这种无核酸水，呃，酶水，也有的人会用D1PC水啊，这些都是可以的，如果您是，呃，用于比如说我们一些特殊修饰的这种刮核苷酸用于动物实验，如果是用于动物实验，我们可能就会建议你使用像PPS或者生理盐水去溶解，而不是使用那个细胞实验的一些水去溶解。嗯，MCE这边可以提供肽和寡和苷酸定制吗？啊，对的，是可以提供相关的定制，主要是要看您这个，呃，就是评估您这个肽的序列有没有合适的位点和我们这个瓜甘酸偶列，所以需要具体的一个呃序列我们进行评估，然后帮您确定这个合成难度，偶联难度，呃，才能给你提供具体的一个方案。

嗯，有小伙伴问，如果想筛选一些动物特异性的CPG寡核苷酸，这边有现成的库还是需要自己设计呢？嗯，CPG寡核苷酸其实我们是有相应的一些产品的，嗯，一般这个这个的话，嗯，没有没有。自己设计的，我倒是没有见到过，我们是可以帮您提供我们已有的这些寡核苷，呃，CPT寡核苷酸。大概有几十种。那我们最后一个问题是啊，我们干粉储存的话，保存时间是多久呢。干粉的话，一般您如果是-20°，保存得当的话，是可以保存一年。

好的，那我看到我们的问题大概是这样的，呃，回答完了，如果您还有其他问题呢，欢迎在我们MC的公众号后台留言，或者是咨询我们的销售销售同事，然后我们也会有技术同事为您服务呢，那非常感谢嗯，王老师今天的精彩分享，也感谢每一位参与直播的观众。本次直播即将结束了，想要观看回放的朋友可以先关注我们的MC公众号，在后台回复MC直播，也可以关注我们的MCE视频号，所有往期直播的回放内容以及相关的产品信息都可以在我们官网上的嗯活动中心下的萌家学堂板块中找到。同时呢，别忘了关注我们的MCE小红书账号MCE中国每月都有精彩纷呈的福利活动等你来参与。以及如果你有任何关于我们产品咨询，定制需求，或者是售前售后的问题以及合作的事宜呢？欢迎大家通过以上的联系方式随时来联系我们。

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