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Elabscience 4,6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐(DAPI)染色液，精准标记每一个核
内容概要本文聚焦 Elabscience 4',6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸yan(DAPI)染色液（货号为 E-CK-A163） 的 25μg/mL DAPI 染色液，从产品核心信息、技术背景、检测原理 产品介绍Elabscience 4',6 - 二脒基 - 2 - 苯基吲哚二盐酸yan（DAPI）染色液，浓度设定为 25μg/mL，货号为 E-CK-A163。 应用领域基于其优异的染色性能，该 DAPI 染色液可广泛应用于多种科研技术场景：荧光显微术：用于细胞涂片、组织切片等样本的细胞核定位与观察，清晰呈现细胞形态与核结构。 染色液（货号 E-CK-A163）凭借其高特异性、强灵敏度、优异的光谱兼容性及稳定的性能，成为细胞核染色的理想选择。 众多高影响力文献的引用更是印证了其在科研领域的认可度，相信这款 DAPI 染色液将成为科研人员探索生命奥秘过程中的得力助手，为各类细胞学与分子生物学研究赋能。
49510编辑于 2025-09-18 细胞迁移 VS 侵袭大不同！想要划痕和 Transwell 实验的实操？包会的！ | MedChemExpress (MCE)
实验材料实验前准备：细胞、培养基、Transwell 小室或培养皿、划痕工具 (无菌移液枪尖、划痕刮刀或细胞划痕器)、显微镜、合适的染色试剂 (如结晶紫或 DAPI)。 实验材料实验前准备：Transwell 小室 (通常为 8 μm 的孔径)、细胞、培养基、化学趋化因子、PBS、甲醇或 4% 多聚甲醛、染色试剂 (如结晶紫、DAPI 或吉姆萨染色)、移液器和枪头、显微镜 固定结束后，用 PBS 冲洗细胞两次，去除多余的固定液。(7) 染色细胞：将染色剂 (如 0.1% 的结晶紫溶液) 加入 Transwell 的上室染色 20-30 分钟。 、DAPI 或吉姆萨染色)、移液器和枪头、显微镜。 固定结束后，用 PBS 冲洗细胞 2 次，去除多余的固定液。(7) 染色细胞：将染色剂 (如 0.1% 结晶紫溶液) 加入 Transwell 上室染色 20-30 分钟。
1.6K11编辑于 2024-11-18- 来自专栏生命科学
细胞凋亡检测方法有哪些？常用的细胞凋亡检测实验步骤 | MCE
1.2 细胞核染色分析在凋亡细胞中，质膜通透性和染色质浓缩发生变化，可以使用 DAPI、Hoechst 以及碘化丙啶 (PI) 荧光染料， 通过流式细胞仪或荧光显微镜轻松检测到。Figure 5. DAPI, Hoechst 和 PI 的荧光染色效果图[6][7]。(A) 甲基乙二醛(MG)(1.5 mM, 24 h)诱导PC12细胞凋亡，并用PI和Hoechst 33342染色。 (B) DAPI(蓝色)和TUNEL(绿色)染色凋亡的MODE-K细胞。 添加新鲜培养基并轻轻悬浮细胞 制成单细胞悬浮液。1000 ×g 离心 5 分钟，然后弃去上清液。加入 1 mL 预冷的 PBS 重悬细胞沉淀，1000 ×g 离心 5 分钟弃上清，保留细胞沉淀。2. (4) 通透：加入通透液室温孵育 5 分钟。(5) 洗涤：加入 PBS 洗涤 2 次，每次 5 分钟。轻轻弃去 PBS，并用滤纸吸去多余的液体。
1.4K11编辑于 2025-05-19 常见实验技术∶ 免疫染色 (IHCICCIF) Get 全流程!_MedChemExpress(MCE 中国)
通透：加入 0.1–0.25% Triton X-100 (PBS 配制)，覆盖细胞，室温下通透 5-10 min；2. 洗涤：使用 PBS 缓冲液清洗 3 次，以去除残留通透液。 洗涤：回收一抗工作液，用 TBST/PBST 摇床缓慢清洗 3 次，每次 5~10 min，以去除未结合的抗体。洗涤次数和时间可根据实验条件调整。3. 洗涤：去除/回收二抗工作液，用 TBST/PBST 摇床缓慢清洗 3 次，每次 5 ~ 10 min，以去除未结合的抗体。洗涤次数和时间可根据实验条件调整。 第六步：复染目的使用染色剂对细胞核进行染色，直观地区分细胞核和其他细胞及抗原结构的位置，便于观察和解读实验结果。步骤在清洗完毕的细胞中滴加 DAPI，室温避光静置约 30 s。 Pathobiology. 2022;89(5):343-358.
99011编辑于 2025-06-25- 来自专栏聊点学术
如何降低荧光实验的自发荧光？
免疫荧光染色图片非常绚烂，其实验步骤并不复杂。仅仅是将普通二抗换成荧光标记的二抗，避光操作，DAPI染核，最后采用荧光显微镜在不同波段激发下采集图片，其它步骤几乎与传统的IHC步骤一致。 标本的固定时间不是越久越好，常规固定1-2天即可，最忌讳的就是采用长期浸泡在固定液中的组织进行免疫荧光标记实验。 小编建议，为了尽可能是缩短固定时间，应该将组织切成适当的薄块（厚度不要超过5mm）后进行固定，而不是整个大组织块扔进去。 小编建议，至少二抗之后的漂洗要尽可能多洗几遍，5min*5次是可参考的。 5 — 抗荧光衰减剂与荧光淬灭剂 现在很多的试剂商都供应了含DAPI的封片剂，不仅可以染核，还有防止荧光淬灭的成分。 对于表达较少或荧光信号较低的多标记实验而言，Evan's蓝或者台盼蓝染色可能会降低荧光信号的敏感度。 现在很多的试剂商都供应了含DAPI的封片剂，不仅可以染核，还有防止荧光淬灭的成分。
2.7K60发布于 2020-07-22 - 来自专栏技术文章
选对染料少走弯路，Elabscience 流式死活染色试剂获全球科研认可
相同样本排除死细胞前后结果对比（A组未加死活染料染色，B组加入PI染料进行染色）2. 自发荧光干扰：死细胞会导致背景自发荧光增强，其信号强度甚至可能超过某些荧光素的真实信号。 核酸染料（适用于未固定样本）该方法的原理基于活细胞膜的完整性：活细胞因膜结构保持完整，具有选择透过性，使得PI、7-AAD、DAPI这类核染料无法进入细胞内部，因此不会显现荧光；而死细胞由于膜已破损，染料可进入细胞内并与核酸结合 使用时，在完成流式抗体染色后，于上机前加入核酸染料并进行短暂孵育。 使用时，在流式抗体染色前进行死活细胞染色，清洗后细胞可继续进行固定和破膜操作，且其荧光信号不会丢失。不同样本如何选择？并非所有样本都必须要进行死活染色。根据我们的经验，为您提供以下实操建议：1. 但若不太新鲜或处理不当，仍建议染色。2. 脾脏/淋巴结等组织：样本制备难度相对容易，可根据单细胞悬液的质量决定。若镜下可见较多碎片，建议进行染色。3.
9600编辑于 2025-12-31 - 来自专栏流式抗体推文
告别检测困扰！Elabscience 教你高效区分脾脏、骨髓等组织驻留巨噬细胞
（E-CK-A163）、MerTK系列抗体（火热上线中，详询）流式抗体染色并分析结果检测结果。 数据分析流程：圈出DAPI-的活细胞群，进一步圈出CD45+的白细胞群，再分析圈出lineage-(CD3/CD19/Ly6G/CD49b)细胞群（排除掉T细胞/B细胞/粒细胞/NK细胞），进一步圈出CD11b 三、组织驻留巨噬细胞的检测流程和注意事项（1）脾脏巨噬细胞检测方案①脾脏单细胞悬液的制备：取新鲜的小鼠脾脏样本，研磨法或者使用1 mL注射器吹打等方法制备成单细胞悬液，300×g离心3-5 min，弃上清 （2）骨髓巨噬细胞检测方案①骨髓单细胞悬液的制备：对小鼠实施安乐死，用70%乙醇浸泡3-5 min。 150-300×g离心3-5 min，弃上清，即为小鼠骨髓细胞。②骨髓单细胞悬液的流式检测：使用Cell Staining Buffer重悬细胞计数，调整细胞密度至1×106/mL。
77710编辑于 2025-09-22 - 来自专栏生信菜鸟团
Nature ecDNA 系列 | 增强转录-复制冲突能够靶向消除含有 ecDNA 的癌症
pRPA2-S33 免疫荧光（IF）结合 EGFR FISH，在加入 5-乙炔基-2'-脱氧尿苷（EdU）30 分钟后；细胞核用 DAPI 共染色。左，代表性图像。 将等体积的主混合液加入到分装的核中（每个重复 5 百万个核），并在 30 °C 下轻柔摇动孵育 5 分钟。 染色质在4°C下以1,400g离心5分钟，然后在1 ml TE缓冲液加0.1% SDS中重悬，使用Covaris E220进行超声处理，设置如下：140 W，10%占空比，每次脉冲200个循环，每个样本 在 37 °C 下孵育过夜后，载玻片用 2× SSC 洗涤以去除非特异性结合，随后进行 DAPI 染色。 对于焦点数量分析，通过自动阈值和分割分析了 DAPI 染色、IF 染色和 DNA FISH 通道，分别对应细胞核、pRPA2S33/γH2AX 焦点和 DNA FISH 焦点。
76810编辑于 2024-12-20 AbMole荧光染料：点亮您的科研成功之路
细胞核染色细胞核染料主要有DAPI和Hoechst系列产品。DAPI的最大激发和发射波长分别为350和460 nm，发蓝色荧光。DAPI无法活染，一般DAPI染色前需要对细胞进行多聚甲醛的固定。 Hoechst则可以对活细胞进行染色，一般在延时成像等持续性的荧光观察实验中会用到该产品，其最大激发和发射波长与DAPI相接近。图3 Hoechst 33342染色效果图2. 图4 JC-1染色效果图3.活死细胞染色试剂盒：Calcein AM /PI当需要对细胞的存活和死亡进行分析时，可以使用Calcein AM /PI双重染色法。 通过上述两种荧光染料的双重染色即可分辨出细胞群体中死亡和存活的细胞。图5 活死细胞染色效果图4. 图6 Annexin V-FITC/PI凋亡检测5.
23400编辑于 2025-12-23基于image-based的空间转录组的细胞分割技术
作者，Evil Genius5月的最后一天了，马上过六一儿童节了，心思已经不在工作上了。 在 Xenium 原位基因表达测定中，DAPI 图像用于使用机器学习算法推断细胞核边界;然后通过各向同性核膨胀推断细胞边界。 基于从细胞核扩展到细胞内部染色边缘的细胞分割方法:该方法包括深度学习模型和使用内部染色推断细胞边界的核扩展方法。采用内部染色(18S rRNA标记)和DAPI染色检测细胞核。 细胞核扩展:对于没有边界或内部染色的细胞，以细胞核(DAPI)扩增距离为5µm或直到遇到另一个细胞边界其中细胞核扩展一旦样品中细胞核的位置被模型识别，一个启发式的细胞边界扩展步骤被执行。 细胞核边界扩大5µm或直到它们在X-Y方向遇到另一个细胞边界。如果在扩展过程中细胞边界重叠，则使用概念上类似于Voronoi镶嵌的算法来解决。
85910编辑于 2024-05-30- 来自专栏生信菜鸟团
Nature | 什么可以决定细胞的癌变能力？
◉ 对指定年龄和基因型的小鼠进行水平视网膜切片，用DAPI（蓝色）和检测粘附连接处F-肌动蛋白的标记物（绿色）、水平细胞（钙调素，绿色）和光感受器前体细胞（CRX，绿色）进行染色。 接下来通过移液器小心地将消化液弃去，而不扰动视网膜。 在含有10% FBS的神经基础培养基中，用P1000移液头缓慢吸打10到15次，对视网膜进行机械研磨。 随后在37摄氏度下用DNA酶处理5分钟。 细胞悬液使用摆臂转子在200g下离心5分钟。 小心吸去细胞沉淀上的上清液，并将沉淀重悬于1-5毫升含1% FBS的神经基础培养基中。 通过50微米细胞筛过滤细胞以去除细胞团块。 和DAPI染色（补充图9a）。 然后样品接受DNA酶处理（每1 ml解离液加入5 μl DNAse I（无RNA酶重组DNA酶I；Roche）），在37 °C下孵育5分钟。 细胞悬液随后使用摆臂转子在200g下离心5分钟。
37010编辑于 2025-06-08 - 来自专栏生信菜鸟团
Nature ecDNA 系列 | 癌细胞中 ecDNA 的协调遗传
Para_03 我们接下来使用三种正交方法（图1d）研究了单细胞中ecDNA拷贝数的分布：(1) 通过DNA-FISH进行中期染色体扩散；(2) 分离单核并进行基于液滴的单细胞转座酶可及染色质测序（scATAC-seq 然后用 0.5× TAE 缓冲液洗涤插块三次，每次孵育 5 分钟。 简而言之，我们使用先前描述的方法产生的Tn5转座酶在50 µl反应体系中与TD缓冲液、10 ng DNA和1 µl转座酶一起进行DNA转座。 干燥后的载玻片用 Hoechst（1:4,000，2 分钟）染色，并用 PBS 再次洗涤 5 分钟。 细胞核用 4,6-二氨基-2-苯基吲哚（DAPI）（50 ng/ml）在 2× SSC 中染色约 1 分钟，然后在双蒸水中快速洗一次。 风干的样品用 ProLong Diamond 封片。
73910编辑于 2024-12-05 - 来自专栏聊点学术
【附加篇】免疫荧光相关的注意事项
； （3）DAPI染细胞核时，加入的试剂太多，造成高背景染色； （4）组织切片预处理不当或采用石蜡切片，导致高背景染色； （5）采集图像过程不当，导致原始图像不佳，直接影响后续半定量分析。 （2）目标蛋白的荧光太强，甚至形成非特异性的标记，一些背景染色可能被误认为阳性区域，造成假阳性结果 这种情况一般出现在抗体浓度过高而漂洗又不充分的时候。 （3）DAPI染细胞核时，加入的试剂太多，造成高背景染色 现在都是使用的防荧光衰减DAPI试剂，使用时滴上一滴就能将细胞核标记。 但是这也带来一个小问题。 因此，滴加的DAPI不要太多，只需覆盖上薄薄的一层即可。事实上，个人认为只要切片没有暴露在自然光或者激发光之下，荧光的自然衰减并没有想象中那么快。 （5）采集图像过程不当，导致原始图像不佳，直接影响后续半定量分析 采集图像时不要对每一张图像都加上标尺，否则后期采用Image J或者IPP进行分析时，这些标尺会对结果造成影响。
2.7K20发布于 2020-12-11 - 来自专栏生信菜鸟团
细胞图谱 | Nature | 人类胚胎骨骼发育的多组学图谱
在 PBS-T 洗涤后，所有滚环产物 (RCPs) 在室温下与 LM（Cy5 标记混合物与 DAPI）杂交 30 分钟，切片用 PBS-T 洗涤并在 70% 和 100% 乙醇中脱水。 染色前，新鲜冷冻切片在 4°C 下用含 4% 多聚甲醛的 PBS 固定 45 分钟，然后依次通过 50%、70%、100% 和 100% 的乙醇脱水，每次 5 分钟。 所得的细胞悬液用DAPI（Invitrogen）进行活细胞染色，使用FGFR3抗体（1:50；Thermo Fisher Scientific）和TACR3抗体（1:50；Thermo Fisher Scientific 通过BigFoot光谱细胞分选仪（Thermo Fisher Scientific）及其专有软件，对DAPI阳性的单细胞进行DAPI染色的FACS门控。 液滴过滤标准为超过 200 个基因且线粒体和核糖体读取比例低于 5%。 双倍体去除方法如下所述。
99910编辑于 2024-12-27 - 来自专栏生命科学
细胞凋亡——如何检测？| MedChemExpress
细胞凋亡的主要形态学特征包括：染色质固缩、DNA 片段化、细胞膜起泡、细胞皱缩、凋亡小体的形成等。 1.2 细胞核染色检测细胞凋亡时，细胞膜通透性增强，染色质发生固缩，故经 DAPI、Hoechst系列等荧光染料染色后可快速检测细胞凋亡。除了实验操作简单、成本低廉之外，细胞核染色还可以定量。 碘化丙啶 (Propidium Iodide, PI) 染色液是一种不能穿透细胞膜的红色荧光染料，可对凋亡晚期细胞及坏死细胞染色。 Int J Mol Sci. 2020, 21(5): 1612.7. Gu HZ, Lin RR, Wang HC, et al. Oncol Lett. 2017, 13(5): 3032-3038.8. Wei R, Cao J, Yao S.
88830编辑于 2023-02-06 - 来自专栏微生态与微进化
Nature新技术分享：自动化拉曼光谱仪用于活细胞功能分类
、涡流的影响，用毛细管对准小孔管，细胞混悬液从毛细管喷出。 同时与四周流出的鞘液一起流过敏感区，保证细胞混悬液在中间形成单个排列的细胞流，四周被鞘液围绕），实际效果如下面视频1所示。 如图3b所示，经过反复测量显示细胞拉曼光谱测量时间越长，PL与PC值越稳定，PC值需要2秒时间测量足以稳定，而PL值需要5秒时间。 作者将氘标记的大肠杆菌细胞使用DAPI染色（附件图2a所示），然后输入平台进行连续一小时的运行分选，收集到的细胞在荧光显微镜下进行计数，最终计算可得回收效率为82.1± 2.7%。 接下来评估分选准确率，作者将没有氘标记的大肠杆菌细胞用DAPI染色，并与氘标记的细胞进行1比1混合（附件图2b所示），然后输入平台连续一小时的运行分选，然后检测收集的细胞中DAPI染色细胞（也即未标记细胞
1.4K30编辑于 2022-05-05 - 来自专栏生信菜鸟团
Nature | 从 ecDNA 层面研究肿瘤异质性与可塑性问题
为了确定微环境压力如何影响染色体和染色体外MYC动态变化，我们最初将AmpliconArchitect应用于从两个WRi PDO培养物中获得的全基因组测序数据（扩展数据图5a）。 在杂交后的洗涤步骤完成后，用 DAPI（1 μg ml−1，Kreatech, Leica）对载玻片进行复染。 细胞核被采集并显示为蓝色（DAPI）。 对于 PDOs，图像通过 Leica TCS SP5 荧光显微镜获取。 细胞核通过 DAPI 荧光染料进行复染和可视化。 每反应使用 1 ng 基因组 DNA，总体积为 20 μl，包含探针（来自 20X 储备液）和限制性内切酶（来自 5 U μl−1）。
63810编辑于 2025-04-26 - 来自专栏空间转录组
Cell Res | Stereo-seq揭示人类肝癌浸润区促进肝细胞-肿瘤细胞串扰、局部免疫抑制和肿瘤进展
c 一例代表性 ICC 患者组织的多重免疫荧光染色（ARG1、CK19、CD68 和 DAPI）。ARG1、CK19 和 CD68 分别是肝细胞、恶性细胞和巨噬细胞的标志物。 侵袭区JAK-STAT3激活诱导受损肝细胞亚型SAAs的高表达a 基于 Stereo-seq 数据（LC5-M）和相邻冷冻切片的 IF 染色（HNF4α、SAAs 和 4'-6'-二氨基-2-苯基吲哚， h 多重免疫荧光染色（ARG1、STAT3、SAAs 和 DAPI）显示 STAT3 在浸润区 SAAs 肝细胞中的高表达（来自验证队列 4 的代表性 ICC 患者）。 多重免疫荧光染色（CXCL6、SAAs、CK19 和 DAPI）显示肿瘤细胞靠近 SAAs 周围肝细胞边缘的高 CXCL6 表达（验证队列 4 的 ICC 患者）。 、CD68、SAAs 和 DAPI）。
30400编辑于 2025-05-29 - 来自专栏生物信息云
免疫组织化学实验
水合处理后，将组织切片放入纯水中，孵育 5min， 再转移放入 PBS 缓冲液中孵育 5min。 用 PBS 浸泡清洗 3 次，每次 5min，尽可能洗去残留的过氧化氢。将切片浸入 0.01M 枸橼酸缓冲液中，微波中大火力加热至沸腾并保持 8min，取出容器，待缓冲液温度自然降到室温。 孵育结束后， 去除封闭液，滴加一抗工作液， 4°C 孵育过夜。第二天，移去一抗后，用 PBS 洗两次，每次 10min.擦去切片周围多余的液体，滴加二抗工作液，室温孵育 30min。 化学染色 去除切片上多余的 PBS,滴加新鲜配制的 DAB 工作液，湿盒孵育，在显微镜下监测染色程度。染色结束后， PBS 浸泡洗去 DAB 染液，每次 5min，重复 3 次。 通过延长封闭时间、适当增加封闭液浓度也能降低非特异性组分与抗体的结合。DAB 的显色要在显微镜下监控，达到理想的染色程度时立即终止反应，避免染色时间过长或 DAB 浓度过高。
1.3K31发布于 2019-09-17 - 来自专栏生命科学
H2DCFDA | ROS 荧光探针检测法
H2DCFDA 工作液的配制 1、储存液的配制：用 DMSO 配制 10 mM 的 H2DCFDA (2,000×)，如用 1.03 mL DMSO 溶解 5 mg H2DCFDA。 注：H2DCFDA 储存液建议分装后-20℃ 避光冻存，一个月。-80 半年。 2、工作液的配制：用预热好的无血清细胞培养基或缓冲液 (如 PBS) 稀释储存液，配制终浓度为 5-10 μM 的 H2DCFDA 工作液 (1×)。 下面图 5a 就可以看出对 H2O2的高选择性。此外，用 H2O2处理细胞，HKPerox-2 的荧光 30 分钟内就可以到达高峰。染色效果看图5c，亮眼的绿色荧光。
1.5K10编辑于 2023-03-10
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