ceRNA网络构建

今天小编想和大家聊一聊ceRNA机制研究套路

首先，你可能会问：

ceRNA、ceRNA调控网络、ceRNA分析等名词经常出现，这些概念到底有啥区别？

ceRNA全称competing endogenous RNA，是一种能够竞争结合RNA的作用元件。通常lncRNA和circRNA会竞争结合miRNA，我们一般把lncRNA和circRNA可以称作ceRNA。ceRNA调控网络全称ceRNA regulation network，指的是有ceRNA参与的整个调控网络。而ceRNA分析指的是对整个ceRNA调控网络进行分析。一般有circRNA-miRNA-mRNA分析或lncRNA-miRNA-mRNA分析。

ceRNA调控网络内RNA类型好多，感觉无从下手，切入点不是很明确，有没有一些好的建议？

ceRNA调控网络分析中目前包含四种RNA，即mRNA、miRNA、lncRNA和circRNA。其中miRNA处于调控的核心地位，当miRNA被lncRNA或circRNA这类ceRNA竞争结合时，受miRNA调控的mRNA转录水平会上升。

是否mRNA，lncRNA，circRNA和miRNA都具有ceRNA调控机制呢？

并非如此，ceRNA调控机制作为普遍存在的现象，但是并非任何mRNA，lncRNA，circRNA都能够具有MRE，对于不具有共有MRE的mRNA，lncRNA，circRNA来说，就不存在ceRNA调控机制。也就是说有些lncRNA、mRNA和circRNA很有可能是单身狗。

基于这样一个知识背景，我们来看那些正儿八经的不花钱不动脑的故事是怎样炼成的，甩一张流程图，看完这个，总结一下就是用数据分析构建了ceRNA网络，然后做了qPCR验证，当然是不怎么花钱的。

ceRNA分析流程图

第一步就是差异分析的结果，包括mRNA, miRNA, lncRNA三次，其次基于数据进行lncRNA-mRNA共表达分析，这里我们关心正向相关的lncRNA-mRNA，为啥？因为只有实力均衡，才有资格争夺你们的女神啊（miRNA）。然后，基于数据库预测miRNA-lncRNA，miRNA-mRNA关系对，这里，贴心的小编为你整理出预测工具或在线网站。

mirwalk2.0 比较早的一款miRNA靶基因预测软件，支持在线对人类，小鼠，大鼠，狗，牛等物种的miRNA进行靶基因预测分析，能够保持一直更新的在线服务，那都是良心之作呀。

网址：http://zmf.umm.uni-heidelberg.de/apps/zmf/mirwalk2/index.html

starBase v2.0 该数据库采集了6000多份样本，14种癌症来自于37个独立研究的108份CLIP-seq数据，同时辅助降解组实验数据搜寻miRNA的靶标，提供了各式各样的可视化界面去探讨miRNA靶标。除了miRNA和靶标mRNA之间关系，该数据库还进行lncRNA、circRNA、protein与mRNA之间的相互作用分析，并分析了ceRNA机制。该数据库主要包含人、小鼠、线虫3个物种信息。

TargetScan TargetScan数据库是大家比较常用的预测miRNA靶基因数据库，主要通过搜索和每条miRNA种子区域匹配的保守的8mer和7mer位点来预测靶基因。该数据库提供人、小鼠、大鼠、奶牛、狗、猩猩、恒河猴、负鼠、鸡和青蛙等动物信息。

PITA 该数据库基于靶位点的可接性(target-site accessibility)和自由能预测miRNA的靶标，是著名的生物信息学家Segal实验室开发的。主要包含human、mouse、fly和worm的信息，使用者可以通过miRNA预测靶基因，也可以通过mRNA预测miRNA信息，无论是miRNA还是mRNA均可通过提供name或ID进行分析。

网址：http://genie.weizmann.ac.il/pubs/mir07/mir07_dyn_data.html

另外还有本地软件miranda可以进行miRNA与靶基因的结合位点预测哦。

好了，回到我们的套路上，得到miRNA-lncRNA，miRNA-mRNA关系对后，结合lncRNA-mRNA共表达关系，妥妥的三角恋，故事就开始了——构建ceRNA网络。

ceRNA网络

最后找几对关键的lncRNA-miRNA-mRNA进行qPCR验证。然后就没有然后啦，这样的套路你get到了吗？赶紧收藏吧！

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