原创好题分享解答

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生化

原创好题分享解答

第一题

1. A 样品

PAGE：一个条带

SDS-PAGE：一个条带

分析：A 样品在 PAGE 和 SDS-PAGE 中均显示单一条带，说明 A 样品可能是单一亚基的蛋白质。因为在 PAGE（天然电泳）和 SDS-PAGE（变性电泳）条件下，蛋白质的分子结构未被拆分为多个亚基或改变其构象，表明 A 样品是一个单链结构，不含多亚基。

2. B 样品

PAGE：一个条带

SDS-PAGE：三个条带

分析：B 样品在 PAGE 中显示单一条带，而在 SDS-PAGE 中显示三个条带，说明 B 样品在天然状态下是一个多亚基复合物（由多个不同的亚基组成）。在 PAGE 中，由于保持了天然状态，亚基间相互作用保持完整，因此表现为一个条带。而在 SDS-PAGE 中，SDS 和变性条件将多亚基复合物拆解成各自的亚基，因此观察到三个不同大小的亚基条带。这意味着 B 样品可能是一个具有三种不同亚基的寡聚蛋白质。

（是否还存在这种可能，

PAGE中一条带是因为由于电荷形状等原因，导致差异不太大的不同分子质量的相似蛋白质聚集在一起，在后续的SDS处理后，其中的不同蛋白质被分离了，于是产生三个条带）

3. C 样品

PAGE：两个条带

SDS-PAGE：两个条带

分析：C 样品在 PAGE 和 SDS-PAGE 中均显示两个条带，说明 C 样品可能是由两种不同亚基组成的二聚体或复合物。这两种亚基在天然状态下并不完全结合为一个稳定的复合物，或是它们的结合较弱，以致在 PAGE 中可以观察到两个条带。在 SDS-PAGE 中，SDS 将样品进一步变性，但由于原本存在两个不同的亚基，仍然可以观察到两个条带。因此，C 样品可能是由两种不同的亚基组成的复合物。

总结

A 样品：单一蛋白亚基或单链蛋白质，PAGE 和 SDS-PAGE 中均显示一个条带。

B 样品：多亚基复合蛋白，在 PAGE 中显示一个条带，SDS-PAGE 中被拆解为三个不同的亚基条带。

C 样品：由两种不同亚基组成的复合蛋白或二聚体，在 PAGE 和 SDS-PAGE 中均显示两个条带。

第二题

1. 鱼藤酮、安密妥、杀粉蝶菌素

作用位点：这些物质主要作用于电子传递链复合物 I

过程：复合物 I 将 NADH 的电子转移至泛醌 (CoQ)。鱼藤酮、安密妥和杀粉蝶菌素抑制 NADH 向 CoQ 的电子转移，导致复合物 I 后续的电子流被阻断，抑制了氧化磷酸化中的 ATP 生成。

2. 抗霉素 A

作用位点：抗霉素 A 主要作用于电子传递链复合物 III。

过程：复合物 III 负责将电子从还原态的泛醌传递到细胞色素 c。抗霉素 A 阻止电子从复合物 III 传递给细胞色素 c，导致电子传递链停滞，ATP 生成受阻，氧化磷酸化效率降低。

3. 二巯基丙醇

作用位点：二巯基丙醇本身并不直接作用于电子传递链中的特定复合物。

过程：二巯基丙醇作为一种螯合剂，主要通过与金属离子（如铁）结合，干扰含金属的酶（如氧化还原酶）活性。由于电子传递链中的某些复合物依赖金属离子，因此二巯基丙醇的作用会间接影响电子传递链的正常运作。

4. 氰化物 (CN⁻)、一氧化碳 (CO)、叠氮化物 (N₃⁻)

作用位点：这些物质主要作用于电子传递链复合物 IV（细胞色素 c 氧化酶）

过程：复合物 IV 将电子传递至氧分子形成水，氰化物、CO 和叠氮化物会与复合物 IV 中的铁或铜结合，阻止电子传递至氧，导致整个电子传递链停滞，ATP 生成完全受阻，造成细胞缺氧性损伤。

5. DNP（2,4-二硝基苯酚）

作用位点：DNP 作用于线粒体内膜上的质子梯度。

过程：DNP 是一种解偶联剂，它将质子从线粒体内膜的两侧重新分布，破坏了通过电子传递链建立的质子梯度。由于质子梯度被中和，ATP 合酶无法利用质子驱动 ATP 合成，尽管氧化还原反应继续进行，但氧化磷酸化被解耦，不生成 ATP。

6. 寡霉素

作用位点：寡霉素作用于ATP 合酶（复合物 V）。

过程：寡霉素结合 ATP 合酶的 F₀ 亚基，阻断质子通过 ATP 合酶的通道。质子梯度无法驱动 ATP 合成，抑制了氧化磷酸化过程中的 ATP 生成。

7. 缬氨霉素

作用位点：缬氨霉素主要影响线粒体内膜的电化学梯度，对钾离子（K⁺）的跨膜平衡有选择性作用

过程：缬氨霉素是钾离子载体，会促进钾离子跨内膜流动，破坏质子梯度建立的电化学势差。尽管质子梯度未被完全消除，但电势差无法形成，使 ATP 合酶难以驱动 ATP 生成，导致氧化磷酸化效率下降。

「READING」

第三题

1. 糖酵解

己糖激酶/ 葡萄糖激酶：催化葡萄糖磷酸化生成葡萄糖-6-磷酸，调控糖酵解起始。

磷酸果糖激酶-1（PFK-1）：催化果糖-6-磷酸转化为果糖-1,6-二磷酸，是糖酵解的限速酶。

丙酮酸激酶：催化磷酸烯醇丙酮酸转化为丙酮酸，是糖酵解的最后一步。

2. 三羧酸循环

柠檬酸合成酶：催化乙酰辅酶 A 和草酰乙酸生成柠檬酸，调控三羧酸循环的开始。

异柠檬酸脱氢酶：催化异柠檬酸脱羧生成 α-酮戊二酸，是三羧酸循环的限速步骤。

α-酮戊二酸脱氢酶复合体：催化 α-酮戊二酸生成琥珀酰辅酶 A，为循环提供 NADH。

3. 尿素循环

氨基甲酰磷酸合成酶 I：在线粒体中将氨和二氧化碳转化为氨基甲酰磷酸，启动尿素循环。

鸟氨酸转氨甲酰酶：将氨基甲酰磷酸与鸟氨酸结合生成瓜氨酸。

精氨酸代琥珀酸裂解酶：将精氨酸代琥珀酸裂解为精氨酸和延胡索酸，后者进入三羧酸循环

4. 脂肪酸代谢

乙酰辅酶 A 羧化酶（ACC）：催化乙酰辅酶 A 转化为丙二酰辅酶 A，是脂肪酸合成的限速酶。

脂肪酸合酶：催化一系列反应，将丙二酰辅酶 A 和乙酰辅酶 A 结合生成长链脂肪酸。

肉碱脂酰转移酶 I（CPT-I）：位于线粒体外膜，负责脂肪酸氧化过程中的脂肪酸进入线粒体，是 β 氧化的调控步骤。

5. 胆固醇代谢与合成

HMG-CoA 还原酶：催化 HMG-CoA 转化为甲羟戊酸，是胆固醇合成途径中的限速酶，也是他汀类药物的靶标。

胆固醇 7α-羟化酶：将胆固醇转化为胆汁酸，是胆固醇降解的关键步骤。

6. 氨基酸代谢与合成

谷氨酰胺合成酶：催化谷氨酸与氨生成谷氨酰胺，在氨的代谢和转运中起重要作用。

谷氨酸脱氢酶：催化谷氨酸脱氨生成 α-酮戊二酸，参与氨基酸分解。

转氨酶：如丙氨酸转氨酶和天冬氨酸转氨酶，催化氨基转移反应，是氨基酸代谢的重要酶。

7. 核苷酸代谢与合成

PRPP 合成酶：催化 5-磷酸核糖与 ATP 生成 PRPP，是嘌呤和嘧啶合成的前体。

谷氨酰胺-磷酸核糖基转移酶：在嘌呤合成中将谷氨酰胺转化为 5-磷酸核糖胺，是嘌呤合成的限速酶。

胸苷酸合成酶：催化 dUMP 转化为 dTMP，是嘧啶合成中的关键酶，常为抗癌药物的作用靶点。

第四题

在 SDS-PAGE 电泳中，TEMED 的全称是 N,N,N',N'-四甲基乙二胺。它的主要作用是促进丙烯酰胺与双丙烯酰胺在过硫酸铵（APS）引发的自由基聚合反应，从而加速凝胶的聚合形成，使 SDS-PAGE 凝胶迅速固化。TEMED 通过催化 APS 生成自由基，加快丙烯酰胺的聚合速率，使凝胶形成得更加均匀。

在测定酶活性的实验中，高浓度的三氯乙酸（TCA）主要用于终止酶反应并沉淀蛋白质。TCA 是一种强酸，加入后可迅速改变溶液的 pH 值，使酶失活，从而有效终止反应。此外，TCA 能将蛋白质变性并沉淀下来，便于分离酶活性产物，减少杂质干扰，方便后续的分析和测量。

第五题

只对应一种密码子的氨基酸有两个，分别是：

甲硫氨酸（缩写 Met）：其唯一的密码子是 AUG。AUG 既是编码甲硫氨酸的密码子，又是大多数生物体中蛋白质合成的起始密码子。

色氨酸（缩写 Trp）：其唯一的密码子是 UGG。

第六题

胰凝乳蛋白酶

识别并切割芳香族氨基酸的羧基端，包括：苯丙氨酸（Phe）、色氨酸（Trp）、酪氨酸（Tyr）。

胰凝乳蛋白酶主要在这些氨基酸的羧基端进行水解切割。

胰蛋白酶

识别并切割碱性氨基酸的羧基端，包括：赖氨酸（Lys）、精氨酸（Arg）。胰蛋白酶特异性较强，在 Lys 和 Arg 残基的羧基端进行切割。

溴化氰（CNBr）

溴化氰特异性识别并切割**甲硫氨酸（Met）**的羧基端。在蛋白质化学和肽段分析中，溴化氰常用于在 Met 残基处将肽链断开。

第七题

一碳单位是指含有一个碳原子的化学基团，这些基团可以处于不同的氧化状态，包括甲基（-CH₃）、亚甲基（=CH₂）、甲酰基（-CHO）等形式。在生物体内，一碳单位的转移和利用在多种代谢过程中非常重要，尤其是核酸和氨基酸的合成。

一碳单位代谢的两个最重要的载体是：

四氢叶酸（THF）

生物学作用：四氢叶酸是叶酸的还原形式，能够携带并转移一碳单位，参与核酸（如嘌呤、胸腺嘧啶）和氨基酸（如丝氨酸、甘氨酸）的合成。

四氢叶酸可以与一碳单位结合并以不同形式存在，例如5,10-亚甲基四氢叶酸、5-甲基四氢叶酸等，在代谢过程中起到关键的中介作用。

S-腺苷甲硫氨酸（SAM）

生物学作用：S-腺苷甲硫氨酸是甲基供体，广泛参与甲基化反应。它将甲基转移给多种底物，包括DNA、RNA、蛋白质、脂类等，在基因表达调控、信号传导、磷脂代谢等过程中发挥重要作用。

SAM 的甲基转移反应在 DNA 和组蛋白的甲基化中尤为重要，影响基因的表达和染色质的状态。

农学考研I