表面等离子共振 (SPR) 实验服务

SPR 技术检测原理

Biacore系统基于表面等离子共振技术  (SPR)，实时记录分子结合和解离过程中传感芯片表面分子质量发生的变化，共振角  (即 SPR 角)就会随之发生变化，从而实时地监测分子间的相互作用。为了研究两个分子之间的相互作用，其中一个分子被固定到芯片表面上 (Ligand)，而另一个分子  (Analyte)以溶液的形式连续流过芯片表面，检测器能实时检测溶液中的分子与芯片表面的分子结合、解离过程，并以 SPR 响应值的形式显示。SPR 的方法不仅可以检测是否有特异性的结合，还可以通过数据分析软件获得分子间的结合速率常数  (association rate constant，ka)、解离速率常数 (dissociation rate constant，kd)、平衡解离常数 (dissociation equilibrium constant，KD)等参数。

最新版的美国药典 (USP39)、日本药典  (JP17)、2020年版《中华人民共和国药典》都将 SPR 技术作为分子互作分析“金标准”技术。佰莱博生物利用 Biacore T200、Biacore S200、Biacore 1K、Biacore 8K 平台，可开展 SPR 技术相关研究。

表面等离子共振技术 (SPR) 技术原理

SPR 基本实验流程

表面等离子共振技术 (SPR) 实验流程

SPR 技术检测样本种类多

表面等离子共振技术 (SPR) 样本种类

分析物进样方式

多循环 (Multi-cycle) 模式

单循环 (single-cycle) 模式

数据分析方式

应用案例

小分子与蛋白结合实验

1

蛋白与蛋白结合实验

2

多肽与蛋白结合实验

3

多肽3不同异构体及突变体与钙网蛋白 LFA 亲和力测定

核酸与蛋白结合实验

4

Biacore检测 OGT 适配体与靶点亲和力

抗体筛选实验

5

SPR 技术应用与抗体筛选实验

竞争性结合分析实验

6

在化合物 18 和 21 的存在下，泛素与 USP21 的竞争性结合

分子垂钓实验

7

白芍 ( RPA )  中 TNF -R1 结合成分的鉴定

SPR 技术亲和力大小分析

> 亲和素-生物素结合: 10^−14 M

> 强的抗原-抗体结合: 10^−8~10^−10 M

> DNA与蛋白的结合: 10^−8~10^−10 M

> 较弱的抗原-抗体结合: 10^−6~10^-7 M

> 酶与底物结合: 10^−4~10^−10 M

> 蛋白与小分子结合: 10^−3~10^−6 M

技术服务

佰莱博生物提供SPR (Biacore T200、Biacore S200、Biacore 1K、Biacore 8K)、ITC、DSC、ForteBio、MALS、分析型超离、MST (微量热泳动技术)、CD (圆二色光谱技术)等检测分析平台。提供生物大分子表征、生物分子互作分析、药物筛选、生物大分子稳定性分析及制剂筛选等服务。

目前，佰博莱生物技术有限公司分子互作平台已经具有 T 细胞的主要免疫调节因子  (Gal-1，Gal-3和Gal-9)、与糖尿病相关的胰岛素受体 (IR-A、IR-B、IGF-1R)、GLP-1R、HSA等重要靶点相关亲和力研究、血管内皮生长因子 (VEGF 121、VEGF165)、免疫球蛋白 Fc 受体 (Fcγ RI、Fcγ RIIB、Fcγ RIIIA、不同种属的FcRn) 相关亲和力研究、免疫球蛋白超家族的细胞黏附分子 (Nectin-1，Nectin-2，Nectin-3，Nectin-4) 及整合素家族 (aVβ5、ITGB1、aVβ3等) 相关亲和力等重要靶点研究亲和力检测服务。