基因治疗递送载体的原理、工具与应用解析 | MCE原创

大家下午好，我是来自MCE产品部的邵新欣，然后非常开心呢，能够今天下午代表大家，呃，代表MCE为大家开启一场关于基因治疗递送载体的原理、工具，还有应用解析的这样的一场直播，那我将以以下三个方向来进行今天的讲解，首先是关于基因治疗的这个基本的概述，那采用美国的基因与治疗学会在2019年提出来的定义，那基因治疗指的是通过引入、删除或改变人体的一个基因序列啊，用来治疗和治愈疾病，那传递到细胞的遗传物质可以去调控细胞对特定蛋白或蛋白组的表达水平，基因治疗呢，可以降低致病蛋白的表达，提高抗病蛋白的产生。呃或使细胞产生新的呃或者是经过改造的功能性的蛋白，那当前全世界呢，有数以百万人身患遗传性的疾病，那治疗性的基因编辑技术呢，就是能够从啊根本上通过修正缺陷基因彻底去治疗遗传性的疾病，那因此被认为是最有可能攻克遗传疾病的一个治疗治疗的一个方案，那在1989年的时候，基因治疗就迎来了历史上的首次临床实验，William French Anderson, 他针对了呃联合免疫缺陷并进行了基因治疗，它是从一个在1989年从一位四岁女孩的这个体内提取了白细胞，利用了逆转录病毒的载体，将正确编码呃腺苷脱氨酶的ADA基因插入到了白细胞的基因组当中，再将这些呃经过经工程改。

造过的白细胞重新输入到了女孩的体内，那接受治疗之后，这个女孩儿的机体就产生了ADA的这个呃能力，然后呢，William French Anderson呢，也因此被称为基因治疗之父。

但是呢，基因治疗它的发展并非是一帆风顺的，那在1999年的时候，呃，一名18岁的呃美国男孩儿参与了宾夕法尼亚大学的基因治疗项目，他是接受了一个腺病毒的载体啊去注射之后，产生了一系列的这个多器官衰竭的死亡的一个这个状况，那这一事件呢，也呃使得腺病毒载体注射了之后呢，这种呃死亡事件使得基因治疗进入到了一个非常呃这个艰难的一个寒冬时期，那在2000年的时候，呃这个在法国巴黎的呃内科尔医院的一个研究报道了针对于重症免疫缺陷性患者的一个疾病基因治疗的才产生了一个初步的成功，那在2000年这个接受两名呃两名接受这个治疗的这个法国患者呢。

确实在三年之后出现了类似于血癌的症状，但是呢，在2000年后呢，科学家们也没有呃放弃探索的脚步，而是从中汲取了一个教训，不断去完善技术，那在2012年呢？欧洲的这个药品管理局就批准了经因治疗的药物去用于治疗这个脂蛋白脂肪酶缺乏症啊，那这是一种这个肌肉性的疾病，呃，并且呢，在2017年的这个二月份的MIT，呃，Technology review公布了2017年全球十大的突破性技术的榜单，那基因治疗呢，就在这个榜上有名，并且同年呢，中国也开展了首次使用chrisperine技术治疗HIV的基因治疗的临床实验，那基因治疗呢？

就是它在这个呃，递送的这种方式上呢，可以分成这个呃，体内和离体两种，那离体的这个基因治疗呢，它就涉及到这个从患者体内去提取啊一定的这种靶细胞，然后进行基因修饰之后呢，再重新输入到患者体内，但是呢，在体内的这个基因治疗，它是直接将遗传物质去递送到了这个靶组织。呃，这个，然后呢，就是目前而言呢，一共有14种离体的和29种体内的基因疗法都获得了FDA的批准，那其中基于病毒的，呃，这个载体的基因治疗是占主导部位的，那常见的常用的一些病毒载体呢，包含腺相关病毒，腺病毒或者是慢病毒等，那体外的基因治疗呢，则是就是我们先提取了呃这个。

呃，患者的这个。呃，细胞，然后呢，这个在体外完成基因修饰之后呢，再回输到体内啊，例如cart的疗法呢，就是一个非常典型的，呃，体外的基因治疗，那研究人员呢，他是将目的基因通过逆转录病毒输送到T细胞，嗯，然后再将改装后的T细胞回输到病人体内去杀灭癌细胞。那此外呢，体内的治疗也可以进一步去，呃，细分为基因替代治疗或者和这个基因编辑治疗，那基因替代治疗呢，是直接去补充缺失的或者是功能异常的基因，那基因编辑治疗呢，则是在原有的基础上进行精确的编辑，去达到了一个治疗的一个目的。

那成熟的这个一个体内的基因编辑系统呢，就需要去克服装载基因的一个细胞内递送和一些其他的生物障碍，呃，比如说总的来说呢，成熟的体内的这个基因编制系统呢，必须具有以下的基本特征，首先呢，在进入细胞之前呢，装载的这个目的基因必须是完整的，不被破坏的，并第二点呢，就是能够特定结合特定的一个细胞，并且穿越靶细胞进入到细胞质当中，然后呢，将它的装载的这个基因在这个细胞胞内释放出来，那目前呢，这个常见的基因治疗药物呢，包括直立的DNA麦克。RA RA irana和反应核苷酸，还有crisperna的这种系统等等，那不同的这个，呃，遗传物质，它涉及到的基因治疗的机制是不同的，嗯，那在核酸药物它的递送部位和要求。

呃也是不同的，那说起SL rana, 还有s sh irana, 还有Michael rana就不得不提到就是他们，呃，这个rana干扰这个呃治疗方式，那rana干扰呢，它指指的是内源性或者是外源性的双链的这个RADSRNA，它介导细胞内的m rana发生一个嗯特异性的降解，从而导致了这种靶细胞的表达沉默，产生了相应的就是功能的嗯表现缺失的现象。那S sirra呢，它是指的是这个呃一类长。在这个21~23nt的一个双链的RNA分子，一般呢，它在三撇端有两个游离的碱基，那它就通过这个RNA干扰。的方式，呃，就是去沉没了这个目的基因，那sh r rana呢，它是这个依也一种这个依赖净环的序列去产生的短双链ina结构，它在这个呃，它在这个19~25nt左右，然后呢，SHRNA呢，它可以利用载体去导入到细胞当中，然后呢，在细胞当中经过酶切啊形成了s sir rana, 然后呢，通过RNA干扰途径去调控目目标的基因，那右侧的l micro RNA呢，它是在真核生物当中广广泛存在的一种长约呃22nt的一个核酸核糖分子。

那成熟的Michael rana, 它是一个单链的一个rana，那通过降解靶标的一个m rana啊，或者是抑制蛋白质的翻译呃去调节它的这个目标的呃，目标基因的一个表达。那虽然SRA和Michael RA呃，这个呃或者是SHRNA它都可以用于蛋白沉没，但是他们的机制啊是有所不同的。那虽然有一些报道也称为这个也称呃，也报道过这个s ni它的转染细胞当中是这个运送到细胞核当中的，但更普遍的看法是他们是在这个细胞质当中聚集的。

哦，那除了这个核酸药物呢，这个基因编辑装置crirsper case奈它也是一个近些年来非常热的一个这个基因治疗的遗传物质，那它呢是包含多个组分的，那呃chrs percaline呢，它根据这个组分，根据它所需的应用类型呃载体系统和它目标的这个呃细胞类型是有所不同的，但是呢，所有crisper系统呢，都包含两种关键组分，一个是CA斯奈核酸酶和这个向导RNA钙的rana，那钙的RNA呢，它是一种非常短的RNA序列，那通过与这个基因组上的一个DNA的靶序列呃互补配对，然后呢去引导凯斯奈到达了这个靶位点，那开赛呢，它是一种RNA引导的一个DNA的核酸酶。

那它是将这个把把序列的这个相邻的一个，这个就是原间隔的相邻积蓄，也称为PM呃的一个短的DNA的一个呃序列，然后呢，它就可以在特定的这个筋组呃引入双链断裂，那一旦在目标的这个部位引入了双键断裂之后呢，细胞呢，就会使用啊这个DNA修复途径啊去来修复断裂，嗯，那不管是这个体内治呃体内的基因治疗，还有体外的基因治疗，呃一个理想的呃这个基因治疗的载体的一个选择是基因治疗成败的关键，那目前针对于基因治疗的载体一般分成病毒载体和非病毒载体，那在选择适当的基因传递材料的载体的时候，就需要我们去考虑呃目标组织的类型，还有我们要载的基因载荷的大小。

还有对这个目标细胞它的瞬时的一些影响的这些条件，那右图是展示了在临床，目前在临床试验当中各种载体的呃，这个递送载体的占比情况，那其中呢，病毒载体呢，是基因治疗疗法当中最常见的这个递送系统，它也是世界第一个应用于世界呃基因治疗的临床研究载体。嗯，接下来是为大家讲这个，呃，这个关于基因治疗当中，我们可以应用到的这个病毒载体工具。哦，那这个在这个呃，几种关键的这种病毒的载体的平台，还有它的生产方法，在这个20世纪80年代末，还有90年代的时候就已经，呃，经过多年的发展和优化，就已经建立的非常成熟了，那其中也包括一些逆转入病毒啊，慢病毒，腺病毒和腺相关病毒的这几种载体啊，那这几种载体呢，都是病毒载体，它可以利用这种病毒颗粒表面的蛋白，然后呢，与宿主的细胞的受体相结合，那进入到细胞之后呢，所携带的这个治疗基因就会释放到细胞质或者细胞核当中，然后从而实现基因的一个表达，那比如例如这个慢病毒。

载体，它是一种HIV衍生的载体，它是呃用这个包膜蛋白介道，然后与细胞膜融合，然后呢，它就可以将这个RNA或者呃这种基因组啊呃释放到胞质当中，并且逆转录成DNA，然后再整合到这个宿主基因组中，所以呢，这个做细胞系的轮转是用于这个慢病毒应用呢，是是很合适的，因为呢，它支持长期的这个稳定表达，但是它在低度上是有限的，所以它的体内效果是不佳的。而腺相关病毒呢，它的这个呃，而那个重组的腺病毒呢，重组腺病毒它是携带外源的DNA的哦，然后呢，它是通过嗯纤维蛋白，然后与细胞的表面的受体结合，那随后呢，被内吞到这个核内体当中，并且它呃这个破裂这个这个内体膜，然后呢，将这个DNA释放到细胞核当中表达。

所以呢，它适用于一些就是元代的或者是离体组织的一些感染，因为它的感染能力非常强，那心肌细胞啊等等这种成纤维细胞都适用于重组腺病毒的这种，呃，这种感染能力强的这种病毒载体。第三种呢，重组腺相关病毒呢，它是呃没有包膜的一类，然后呢，它依呃依赖这个受体介导式的内吞进入到细胞，然后呢，在细胞核当中，它的单链的DNA就转换成为双链，并且表达了，那它是体内的一些这个呃组织特异性的这些表达呢，适用于这种腺相关病毒，因为呢，它的低度非常高，而免疫源性呃更低一些。

那接下来呢，我就为大家详细的啊讲解关于这个慢病毒，还有腺腺病毒和腺相关病毒这三种病毒载体的一些应用，呃第一种这个腺病毒呢，它是无包膜的双链的DNA病毒，然后呢，它的直径大概在70~90nm之间，它可以容纳呃26~45KB的一个线性的双链的DNA基因组，那到目前为止呢，就是我们呃人们已经这个开发了三代的腺病毒载体，那与第一代和第二代的腺病毒载体相比呢，就是呃这个现在的腺病毒载体，它的免疫毒性是大大的降低了啊，并且呢，呃也保持了比较高的转导率和和适性。

那体外应用的时候呢，呃，腺病毒载体它的传递效率是非常高的，嗯，然后呢，它可以传导不同种类型的细胞，那对于大量的这种难转染细胞的基因递送是一个非常好的工具，那目前呢，我们MCE呢，也可以提供腺病毒相关的一些产品和服务，呃然后呢，可以满足各类实验的呃这个实验要求，那我们呃很多客户呢，可以这个应用于这个一些体外应用，那腺病毒它这个载体它的呃转基因效率是非常高的。嗯，如果是应用于一些体内应用呢，由于这个呃腺病毒它的免疫原性非常强，它的感染非常剧烈，就有可能会引起动物病毒，呃，就是动物局部组织的一些炎症反应和机体的免疫反应，所以说就可能会对这个。

呃，这个呃动物的体内的一些表征的实验结果的客观性造成一些影响，所以我们呃基本的腺病毒包装的这种应用上呢，就是呃一般都是应用于一些难转染细胞的这样的一个体外的一些传染，那那我们MC能够提供的这个腺病毒的包装服务呢，也是这个包装骨架脂粒和一些穿梭质粒，然后呢，去转染293细胞进行进行包装，包装然后呢，通过呃这个呃就是。收集细胞上清和细胞裂解物，然后呢通过梯度密度梯度离心纯化等等，然后呢去纯化病毒，然后呢，可以满足我们这个客户实验的使用要求，那现在相关病毒是我这边介绍的第二种，我们的这个。呃，这个腺，呃，这个病毒载体，它是一种这个不引起疾病的一个小型的啊病毒，它的免疫原性是要低于腺病毒的，呃，然后呢，它可以携带比较小的基因片段，然后呢，将其导入到细胞，呃，腺相关病毒呢，它是可以长期存在细胞当中的，并且一定程度上是稳定表达啊目的基因的。

嗯。嗯，然后呢，它就比较适用于这种就是长期的基因表达，还有慢性疾病的治疗，那现在相关病毒呢，它在目前在生产的时候多采用这种呃三指粒共转染法，那具体就是我们就是在制备的时候，是首先构建并且纯化三个指列，那第一个指令就是呃顺势的这种载体指令去编码线相关病毒的这个目的基因和这个反向的末端序列，呃然后呢，还第二个指令呢，就是这个呃编码这个线相关病毒的这个IP和cap基因，第三个是辅助指粒，然后呢，辅助指令呢，是编编码这个腺病毒的呃辅助基因，然后呢，将这三个指粒共转染到这个相应的细胞株当中，就能从这个在细胞裂解液当中去携带啊这个相关的这个腺相关病毒。

那在这个腺相关病毒，它在这个呃，感染和传染细胞是一系列的一个有序的一个过程，那首先性相关病毒是呃通过一壳蛋白，然后呢，与宿主细胞的表面受体相结合，那随后通过内吞作用进入到细胞，那接着呢，这个病毒颗粒从核内体中逃逸，转移到细胞核当中啊，并且呢，释放出这个。呃，释放出这个ss DNA, 然后呢，转化成这个DSDNA，最终启动这个治疗基因的一个法表达。第三种呢是慢病毒的载体，呃慢病毒的载体呢，它是以这个人体的免疫缺陷型病毒HIV病毒为基础发展出来的，那它的基因组的这个是正链的RNA，那如果要包装成，呃，包装出一个完整的一个慢病毒的话，我们一般需要三指粒或者是四指粒啊，那这个三指粒四指粒啊，它通呃通常都包含了一个转移指粒，还有一到2个包装指粒。

啊和一个包膜指令，那这个呃，在这个慢病毒载体的这个设计当中，目前也已经到这个第三代了啊，并且它也可以实现这种彻底分离了病毒的功能基因，那采用这种四直力的设计的话呢，它的这个转染的复杂度就更高了，但是它就是重组生成复制型的病毒，它的概率就会变得更低啊，所以呃，这个像四殖粒的这种设计呢，在cart疗法，基因治疗等临床应用的时候，都是优效的一个方案。

哦，那我们MC也可以提供这个慢病毒的一些包装服务，然后呢，为我们各位老师提供这个这个这个就是呃，老师们想要含有的目的基因的慢病毒载体，那我们可以做到这个，在这个包装慢病毒过程当中呢，呃，将需要的这个三个直粒或者四个直粒实现高纯度的无内毒素之后体，然后呢，实现这个慢病毒载体的大量包装啊，并且呢，转染到指数这个生长期的293D细胞当中浓缩，浓缩成化，然后呢进行这个。这个低度的鉴定啊，那这个也是我们这个客户呢，还有一些这个，呃，这个生产我们的慢病毒的时候，我们会遵循国际公认的一些标准流程，然后。

交付的这个病毒低度都是可以保证的。接下来呢，为这个各位老师，然后呢，介绍一下子关于重组病毒的呃，典型的一些应用的一些案例，哦，那第一个应用的案例呢，就是我们可以利用这个重组病毒，呃重组的这种呃就是利用慢病毒的这种载体去构建肿瘤细胞的稳转株，去过表达或者是呃或者是敲低某些基因，那这篇文章呢，是这个研究了这个两个基因，一个是OT抗4，另外一个是这个n na OG的这两个这个基因，然后呢，构建了这个慢病毒的载体，然后呢，以SHRA去敲，敲低这个AML的细胞的这两个目的基因，那结果显示呢，呃，这个敲低了CT-4，或者是这个NNLG可以显著的去抑制了这个M，嗯，AML这个细胞增殖，然后呢去诱导的一个凋亡，然后呢，并且。

呢，后续的实验呢，也使这个细胞周期阻滞，嗯，这个是构建了一个肿瘤细胞的稳转株，利用慢病毒载体，那第二个呢，我们也可以，呃，这个在应用实例上呢，可以利用这个慢病毒载体。建立crirsper消除的细胞株，那这篇文章当中呢，是通过设计了靶向这个呃VI lip3的这个钙的RNA，然后呢将这个将其克隆到这个慢病毒载体当中，那经过慢病毒的包装系统的生产了功能性的这个病毒颗粒之后呢，去感染了这个HCC细胞，然后呢去呃构建了这种呃稳定消除呃VILIP3的细胞系，那这篇呃文章的结果就表明，就是基于这种慢病毒的载体去递送chsper cana系统，它就成功的去敲除了它的靶基因了，之后呢，那HCC细胞它对于这个氯雷他定的这个药物化药的敏感性就显著降低了。

第三种是呢，我们可以利用命病毒载体去感染类器官啊，那这篇文章的研究团队呢，也是利用了慢病毒载体，将这个绿色荧光蛋白稳转到了这个患者来源的这个结肠癌结直肠癌的类器官的细胞当中，可以看到，这通过这种这种GFP的这个荧光蛋白的标记，它可以在这个细胞当中高效的表达，那就可以使得呃，就是研究人员他能够在体内实验或者是体外实验，借助这个荧光显微镜，然后呢去追踪这些细胞啊，并且他构建了一个免疫缺陷型的这个这种小鼠模型当中，然后呢，通过这个GFP标记的这种结持昂结直肠癌的类器官可以清晰的去观测到，就是它的这个肿瘤的转移的一个过程。

这是利用慢病毒去感染了类器官，第4个是应用是体内的一个广谱基因的表达调控，呃，这篇文章呢，是利用了这个。这个腺相关病毒，那它是使用了这个这个研究使用了腺相关病毒，然后通过这个呃呃静脉注射的方式，然后呢，在这个这个AI9报告的这个报告基因的这个小鼠中实现了这个TD tomato的这个呃蛋白，它的一个在多个器官的一个高效的一个表达，并且验证了这个这个腺相关病毒这个系统在小鼠体内，它具有一个广谱的一个基因表达的呃这个这个转导的一个能力。第5个呢，我们可以，呃，就是这篇的研究呢，是利用了一个携带于呃这个。

可以重组酶的一个腺病毒，然后呢，它通过这个啊小鼠宫腔注射的一个方式，然后呢局部注射的一个方式啊，与这个lockxp的这种小鼠实现了一个特异性的cream酶的一个表达，嗯，就是呃文章利用这个lockx p小鼠，然后呢就是可以通过对子宫内膜上皮组织特异性的一个等位基因进行了一个消除，那它消这篇文章消除的基因是一个这个呃，这个与癌症相关的脾呃脾ten的这个基因，那敲出之后呢，这个小鼠就显著的发生了这个侵袭性的子宫内膜癌，那同时呢，这篇文章也呃验证就是它消除后呢，伴随着这个PIS3K和AKT信号通路的激活，还有一些这个ER阿尔法的表达的这个下降。

最后一种呢，为大家介绍的是这个嗯，也是文章利用了慢病毒载体构建了一个chsper caine guide RA的文库筛选啊，那这篇文章呢，是利用了慢病毒载体，然后呢将靶向了呃18000多种基因的一个guide的rana的一个文库，然后呢它导入到了人黑色素瘤细胞，就是呃A375细胞当中，然后呢，它通过呃肿瘤抑制剂进行一个药物筛，呃药物筛选的一个复极，然后呢通过NGS的测序和生性分析的一个手段，最终筛选出来与这个肿瘤耐药啊相关的这个六个基因。这是一些重组啊，病毒的一些典型的应用实例。那近些年来呢，我们就是呃，基因治疗呢，一直都是在取得突破的，那针对于多种啊治疗领域上的一些特定的一些细胞群群，那这个但是呢，大多数的这个临床研究都是使用传统的啊这个病毒的载体系统，呃，并且在商业规模上就是但是这种病毒的载体系统，它的一些免疫源性，或者是它在商业规模上就是它具有一个挑战性，或者是成本比较高高昂，那非病毒的载体工具呢，也成为了基因传递当中一个快速发展的研究课题。

哦，那近些年来呢，就是被报道的非病毒的载体工具呢，主要包含以下这个五个大类，那其中呢，这个第一大类就是阳离子的聚合物，嗯，阳离子的聚合物呢，它是一种，呃，就是一直是一种非常重要的一个非病毒的基因治疗载体的一个类型，那它的特点就在于它可能具有一个多功能的多功能的化学结构和潜在的一些高的就是载荷的能力，从而很多研究人员呢，就是进行一些研究，那这个阳离子聚合物呢，它可以。

中和这个嗯，就是带负电的遗传物质，从而形成了一个这个聚合物，就是聚合物复合物，并且呢，就是可以有效的去载载荷这个这个核酸物质，然后呢，其中比如说pig乙酰雅胺，它是1995年就合成了第一个的多阳离子的一个聚合物，它应用于这个基因治疗，并且呢，像这个PI，它也分成了这个线性和支链的一个形式啊，比如说带电的这个pii，它的存在就可以存在一个质子海绵效应，是就是这种渗透的效应，可以诱导这个这个内体它的小泡破裂，从而去增强它对于核酸物质的转染效率。

那PEI呢，这作为阳离子只呃阳离子的聚合物呢，它也具有一个高的缓冲容量，所以它有呃，有利于就是基因的这个物质，它进行一个核内体的逃逸，那目前来讲呢，在阳离子这个聚合物当中的PEI仍然是这个非病毒载体，它转染效率的一个黄金标准。那第二种这个非病毒载体工具呢，是脂质，那脂质呃我们在这个上上一次的直播当中也呃这个详细的讲解了关于这个LNP的应用，那大多数的这个资质呢，都是由这个正，还有正电的一个投机组成，然后它通过呃静电相互作用与核酸的阴离子的一个离酸集团。去结合，然后形成了一个呃脂质的复合物，哦，那自主装的这种呃，这种脂质的尾部的一个结构就可以这个实现，就是嗯，就是呃脂质体，或者说是固体的脂质纳米粒子，嗯，LNT等等，以这种呃或者是以这种脂质乳液的这种形式存在，那与这个阳阳离子聚合物相比啊，脂质它就具有一个生物的降解性，并且它的毒性比较低啊，并且呢，它也可以这个。

包含这个煲载一些亲水性的或者输水性的一些其他物质，那第一个获得FDA批准的一个这个SCI的治疗药物，就是基于了脂质的这个这种载体。第三种非病毒载体工具呢，是多肽，呃，比如说细胞穿透肽，或者是鱼精蛋白，它就是MRA的一个递送的一个重要的一个阳离子态，那这个多肽呢，它可以通过静电相互作用去凝聚这种MRA啊，或者是保护就是MRA啊，那M三巨头的一个这个治疗的这个企业，它就建立了鱼精蛋白的递送载体平台，那并且呢，也已经有这个进入到临床管线的一些这个药物，它去治疗这个相应的一些实体瘤的这种适应症。

第四种呢，是无机材料啊，无机材料呢，它比于一些有机的材料其实是更稳定的，也可以被用用于这个基因载体，那事实上呢，在上世纪的60年代的时候就报道过这个非病毒的基因载体，就是基于磷酸钙的，这也是一种无机材料哦，那近些年来呢，更常见的一些无机载体去递送这个，嗯，这个这个基因治疗的这种药物，药物呢，就包含一些就是硅基的系统，比如说呃，借孔借孔硅纳米颗粒，或者是这个金纳米颗粒，或者是雌性的纳米颗粒，碳那纳米管，还有石墨烯等等，嗯，还有量子碘。

等等的，这种都是无机的纳米颗粒。嗯，那包含一些这个这个这个MRA，如果进行癌症疫苗的递送的时候，也可以采用多种组分混合的这种载体，比如说脂质聚合物肽。呃，还有一些囊泡，外泌体，细胞膜等等，那混合载体它的这个使用呢，它的特点在于就是可以保持每个组分的一个组分的性能，嗯，然后呢，并且同时去可以。补充一些，就是我们研研发，或者是我们科研工作者所所期待的一些特性，比如说这个混合载体当中的啊，脂质聚合物，复合物的研究是比较广泛的。那这篇文章当中呢，它是设计了一些基于聚合物多肽，还有呃，新型的纳米递送系统，外泌体的一个非非病毒的一个MRA的载体，那除此之外混合的载体呢，就是也有这个啊，利用一些脂质聚合物，比如说可电离可电离的脂质啊，输水聚合物和聚乙二醇，嗯，脂质组成，那通过这种组分还有比例的优化，就可以实现一个高的转染效率，呃，那比如说脂质部分采用这个do tap, 呃，纳米乳业采用一些这个，比如说MF59等等都是，呃，就是获批上市的一些疫苗相关的一些佐佐迹，那除此之外，阳离子的纳米鲁也是一个非常有前景的一个MRA递送的一些这个非病毒的载体。

嗯，那以上就是我这次直播的一个。