巨噬细胞极化的研究思路_巨噬细胞极化的诱导与鉴定（2）直播回放原创

最后一个部分呢，我为大家介绍一下子，关于嗯，就是细胞极化的信号通路与相关疾病。那巨噬细胞它的极化呢，是与多种这个疾病是相关的，右图是这个在国自然的这个热点当中，巨噬细胞是与这个它处于一个中心位置，然后呢，周围是一系列国，呃，现在已经这个在这个公开的国自然当中，它相关的那最多的这些，呃，关键词啊，都是与这个疾病来源相关的，比如说在感染性疾病当中的一些这个细菌感染，病毒感染，寄生虫和霉菌感染当中呢，都与细胞极化相关，肿瘤当中呢，最常见的就是研究肿瘤相关巨噬细胞的一些这个研究，那自身免疫性疾病，比如说系统性红斑狼疮，还有类风湿性关节炎等等，都与都会研究巨噬细胞极化，那炎症性疾病呢，更是与这个巨噬细胞也是息息相关的，比如说我们的这种炎症性肠病，或者是多发性硬化，动脉粥样硬化，或者是糖尿病等等。

那在用途当中呢，除了一些这个，呃，这个疾病相关的关键词呢，还有一些其他的国自然热点也是与巨噬细胞研究相关的，比如说外泌体啊，比如说免疫啊，比如说。呃，免疫逃逸，比如说常链非编码RNA或者是微小RNA这种，嗯，RNA研究呢，也都是与这个巨噬细胞相关的。那如图这个左侧图呢，是统计了一个这个近五年巨噬细胞，它的一个这个年度的一个中标量，可以看到是逐年递增的，那在各种这个我们去统计啊，国自然它的一个巨噬细胞的中这个这个中标的一个排名当中，它基本都是排这个第一名和第二名的，并且呢，这个巨噬细胞它也与其他热点，比如说线粒体免疫调控，铁死亡，细胞凋亡等等都是息息相关的，可以以多种关键词的这样的一个呃去启发我们去呃去写国自然的一个中标状况，那右下角是关于这个巨噬细胞在疾病当中作用的一些中标的情况的一些研究，那刚才也提到了这个巨噬细胞的疾病与这一系列的一些抗炎的，或者说是。

呃，抗纤维化等等的这些呃是相关的，那还有去除了疾病呢，也会研究一些这个巨噬细胞，M1型和2型极化与调控，或者是巨噬细胞它的起源，它是呃和发育率分化相关的，那最后呢，还有可以去利用这个巨噬细胞进行一些靶向治疗的一些研究。那接下来呢，我要再为大家介绍一下的巨噬极化，它的一个信号通路的研究，它最常见的巨噬细胞极化呢，与以下这个5种信后通是息息相关的，就第1个是total溃样的，呃，这个受体向后通。

是在在这个巨噬细胞极化的过程当中呢，它可以通过这个突突一样的这个受体信号去激活巨噬细胞，然后促进呃炎症反应和免疫应答，NF卡帕B的这个先后通路呢，它也是与这个重要的转作为一个重要的转录因子，它也可以调控呃巨噬细胞的一个炎症反应，还有免疫调节，那note信号通路呢，它也是一种这个调控呃基因表达的一个这个去调控这个巨噬细胞的一个极化，从而调节一个巨噬细胞的免疫应答。那dak和这个s stat的信号通路呢，它就是被证明与这个巨噬细胞的表型活性是密切相关的PI3K和AKT的这个PI3K的通用呢，它是在这个巨噬细胞存活当中起着重要作用的，那不同，AKT的这种激酶，它与呃对这个巨噬细胞的极化它的影响也是不同的，那右图是展示了一个巨噬细胞它影响到的一个信号通路，与这五种或者是其他的信号通路都是这个息息相关的。

那接下来我为大家讲5~6个这个关于巨噬细胞他们研究的一个热点，第一个热点是巨噬细胞，它对于这个血管和组组织重重构上的一个研究，那这篇文章当中呢，是他利用了一个这个。呃，一种。呃，这种三酸的这种磷脂酰三酸的这种脂质体，那磷脂酰三酸的脂质体也称为这个PSL，然后呢，它是一个人工凋亡的一个细胞模拟物，然后它这篇文章是通过一个钛的一个植入物，然后逐逐层的这种组装，然后呢进一步在这个牙科或者是骨科当中发挥作用。那这篇文章它它是通过这个呃，这种呃，磷脂酰丝氨酸去驱动这种M1型巨噬细胞转化成M2型巨噬细胞，那M2型巨噬细胞呢，它是一个抗炎型的巨噬细胞，它可以发生明显的表型变化，之后呢，进行一个组织再生的作用，在这个细胞层面上呢，可以看到巨噬细胞尽可能的向这个成骨细胞。

成骨型的这种巨噬细胞进行一个转变，那进一步呢，最后表型上呈现了一个组，这个骨再生等等的一个状况。那文章当中呢，将这种这个材料，它设计的这种材料呢，植入到了这种大鼠的股骨的植物模型当中，那研究结果也证明了这种太三菱，它很明显的这个促进了这个。呃，这个免疫调节明显，这个M2型的巨噬细胞啊等等的这个抗炎的这个状况发生了一个明显的提升，这个是巨噬细胞，它可以这个呃应用于一个这个组织重重构的这个呃影响当中。

那第二个热点2呢，巨噬细胞可以向肌成纤维的这个细胞转化，MMT的这个研究，那巨噬细胞像肌成纤维细胞转化呢，是指这种在特定的炎症或者是损伤的微环境当中，巨噬细胞它可以转化成呃肌成纤，肌成纤维细胞，那在组织受到损伤之后触发了炎症反应，那作为炎症反应的一部分巨噬细胞呢，它就会被招募到这个损伤的部位，那巨噬细胞受到了一些这个细胞因子的影响。下呢，它得到了一些肌成纤维细胞的特性，那这些肌成纤维细胞测的特性就包含一些它的标志物，比如说阿尔法SMA蛋白等等一系列这四种蛋白，那下图是文章构建了一个这个通过血管紧张素2构建了一个小鼠的一个高血压的模型，然后呢，可以看到构建了这样的模型之后呢。这个肿瘤细呃这个呃，巨噬细胞，它的明显巨噬细胞，它的一个成纤维细胞，还有巨噬细胞都发生了一个聚集，那红色的这个门呈现的是个巨齿噬细胞，它对比4.27L高到了13.16%，那黑色的这块的这个这个呃，下图当中的这个免疫荧光当中的这个SMA绿色荧光也可以看出绿色荧光和红色荧光呈现了一个共定位的状况，也证明了这个巨噬细胞它呈现了一个成纤维细胞的这样的一个表情分化。

这篇文章是也是与这个器官纤维化相关，这篇文章是文章构建了一个这个。呃，文章构建了一个单侧的输尿管这样的一个阻塞，然后诱导这个中性粒细胞中的一个酶，一个这个GS，呃，GSDMD的这个酶发生了一个激活，那丰富的中性粒细胞呢，它就会可以形成了一个这个细胞外的一个这种net的形成，那进一步呢，这个GSDMD这个酶，它就会这个触发P65异味到细胞核当中，然后通过激活这个TGF贝特s mad的这个信号通路，促进巨噬细胞去分泌一些炎症的细，呃这个细胞因子和这个阿尔法SMA这种成纤维细胞的这个标志性蛋白的一些产生。

然后引起了这个，呃，最后的这个肾部的一个器官的纤维化，就是这篇文章的一个设计思路，那第三种这个设计斯，呃这个热点就是肿瘤相关的这个巨噬细胞。啊，那肿瘤相关的巨噬细胞呢，是这个肿瘤微环境的一个重要的一个部分，右图展示了肿瘤相关的这个巨噬细胞，它在血管生成，然后还有细胞外基质重塑，嗯，癌细胞增殖或者是免疫抑制转移，还有一些化疗的药物检查点阻断的治疗，抵抗当中发挥了一个重要的作用，那一系列的这个肿瘤相关的这个巨噬细胞也是一个很大的热点。

这篇文章当中呢，我为大家介绍一个关于肿瘤相关巨噬，巨噬细胞它的一个，呃，这个参与一个这个肿瘤相关的一个这个亚群上的一个研究。嗯，这个主要是在这个严格意义上来讲，这种肿瘤相关的巨噬细胞，它其实是巨噬细胞的一个亚群，但是就是它。并不是以一个稳态条件下进行存在的，那因此这篇文章是通过了一个单细胞测序分析。呃，去分析到这个整体的这个，呃，肿瘤相关的巨噬细胞，它在特定病理状况下的一个这个状况，他发现了这个，他的这个肿瘤相关，呃，肿瘤相关巨噬细胞，它在这个。哦，这个胰腺的这个导管的，这腺癌的这个。

这个模型当中呢，它的这个主角上描现描述了它的单核细胞，像一个这个从单核细胞，它可以像一个中间过度的状况下的一个短暂的这个巨噬细胞，一个群体，进一步呢，它又呃，产生了两个更长寿的这种终端的分化的巨噬细胞谱系，称为这个TM2和TM3，那这三种啊，无论是过渡期的还是终端的两种期，这种巨噬细胞呢，在这个肿瘤的整体组织内部呢，它具有一个不同的表达谱啊，不同的表型，还有还有具有一个意图，这种不同的肿瘤内的定位，那来自这个嗯，胰腺导管癌的这个腺癌的这个患者，他的一个转入组群，他的一个数据库当中的一个样本，也证明了这种人类中平行的多种的这种肿瘤相关巨噬细胞啊，它的一个进展，还有它不同种的这个。群体它与这个预后是息息相关的，这个是肿瘤相关知识细胞的一个研究，那最后呢，我会再大为大家介绍一个肿瘤相关极化与麦克R它是相关的，那在这个前段时间呢，这个今年的这个诺贝尔的生理和医学奖也这个提名给了这个麦克R研究，那巨噬巨噬相当呃巨噬细胞它的一个极化也与这个麦克RNA其实是息息相关的，因为麦克RNA它会影响到巨噬细胞这个多种这个信号通路刚才提到了，比如说这些note信号通路T然呃这个NF卡帕B信号通路等等，那不同种的麦，比如说这个micro克155 micro克127720233这种促颜的microi，它就可以调控巨噬细胞，像M1型巨噬细胞计化，那像一些抗炎型的micro克I，比如说micro克511，呃，Michael克23A等等，它可以促进这个巨噬细胞像M2型巨噬细胞计化，这个右图是1，呃。

这个一篇综述，它呈现了一个这个麦，它影响巨噬细胞极化的一个信号通路。

那我为大家介绍一篇文章，它这篇文章呢，是这个研究这个呃，巨噬细胞极化与外泌体携带这种麦克I的这个研究，那这篇文章是研究了一个脂肪啊来源的巨噬细胞极化，它参与了一个这个呃，脂肪组织上的一个炎症，那构建的这个小鼠的这个模型，是构建了一个这个与肥胖相关的，还有胰岛素抵胖相关的一个小鼠肥胖模型，然后呢，在机制上的文章发现呢，这个成熟的这种巨噬细胞，这个脂肪细胞呢，它可以通过这个外泌体携带一种micro克I Michael克34A，那麦克34A呢。它通过外泌体转移移到这个巨噬细胞当中，那通过这个影响这个KLF4的表达，从而抑制了这个M2型巨噬细胞的极化，促进了这个巨噬细胞像M1型进行极化，那M1型作为一个促延的巨噬细胞呢？它就是促进了这个脂肪相关的炎症的一个发生，那组织细胞呢？

就是组织细胞呢，它通过一个半泌体的一个方式去调控它的这个靶细胞的一个极化，也是目前研究比较多的一个方式，嗯，那这个就直播间的老师们呢，后续也可以进行一个这个就是这个参考，那那以外媒体和麦克online作为一个这个中间的桥梁，然后去探讨一些这个组织细胞和巨噬细胞之间的相互作用，也可以进行一个这个课题上思路上的一个探究，那右边的一个这个研究结果呢，这个。这个这个这边发表文献呢，发现这个在这个小鼠它的切片当中呢，在这个肥胖诱导第16周后，很明显的这个促进了这个巨噬细胞它的一个表达，那进一步的定量发现呢，这个M1型巨噬细胞的含量明显高于了M2型，并且M2型的这个表达发生了一个意志，那也验证了这个巨噬细胞向M1型这个极化，在机制上呢，它是通过以外泌体，呃，这个递送了micro I促进了它的抗炎表征。

的一个相互作用，嗯导致的，然后呢，以上是我介绍的第5个热点，也是我们这次的全部内容，然后呢，谢谢各位这个直播间的小伙伴，然后。哦，我看到小伙伴们骨哦，骨髓元代诱诱导完成后，细胞可以活多久呢？嗯，这个我们刚刚也建议了，这个我们在骨髓元代这个诱导之后呢，我们在这个以这个骨髓的这种诱导的呃培养基，然后每两天更换一次新鲜的培养基，呃更更换了新鲜的培养基了之后呢，呃，大约可以这个呃这个培养8天左右。

那有小伙伴问的问题是？咱们看一下单核细胞离心分离后可以观察得到吗？嗯，是这样的，如果通过一个密度梯度离心的方式的话啊，那可以看到一个比较这个。薄的白色的这种粘核细胞层，那它在这个血浆和分离液中间，那我们可以通过这个，呃。这个呃，这个针头，或者说是比较这个小的这个一液气的方式把这个细胞吸取出来。好的，那下一个问题是，小伙伴们，原袋肺泡巨噬细胞提取后，有什么方式可以继续培养，培养扩增吗？可以，不存在，只是想收样多一点细胞，实际培养细胞生长缓慢，而且担心表型变化，老师有什么见解呢？

嗯，关于这种元代的巨噬细胞，就是这种肺泡的巨噬细胞，培养的话，就是我们可能尽可能的去多收一点药，但是它生长缓慢，可能还是由于这个我们它提取到的细胞活力，其实这个是息息相关的，那正常培养的话，我们如果说细胞状态比较好的话呢，它的正常表情其实不会明显变化是这样的。好的，那下一个问题是如果通过提取组织蛋白检测相关。检测组织中in OS和agne的表达变化，是不是没有办法说明巨噬细胞极化方向问题呢？嗯。提取组织蛋白检测，嗯，其实我们比较推荐的还是以这个单细胞去分析这个细胞它相应的这个蛋白变化，然后去检测一氧化氮和酶和精氨，呃，这个精氨酸一这个这两种这个标志性蛋白，其实它也因为还有很多多种这种相应极化状态下的这个这个。

我们可以进行表征，比如说这个，呃，我们这个在PPT当中，这个表格当中提这个提到了有四五种蛋白都可以进行一个分析，然后比较建议以单细胞的这样的一个细胞群而不去，呃这个因为组织当中还是可能有多种细胞的，所以我们以分离巨噬细胞这样的一个方式去分析。好，那下一个问题是有小伙伴问，Phpne可以做免疫衰老吗？有什么样的方法？哦，是这样的，嗯，免疫衰老的方式，可能我这边暂时，呃，可以这个。就是还没有查到，但是可以我这个为大家就后续在这个公众号进行一个答疑，这种细胞系呢，它在衰老诱导衰老的时候呢，他可能可能会用多种方式，嗯，那可以查一下子，但是通过免疫方式衰老的话，一般还是通过这种相应的一些诱导的一些这个衰老方式。

好的，那小伙伴们有一些呃呃老师这边目前回答不了的问题，可以在我们公众号留言呢，我们会有相应的销售和我们技术同事再联系您，给您一个详尽的回答，那么下一个问题是句式转化成为。嗯，巨石转化为成纤维后，它的功能上有什么保留吗？比方说吞噬是完全的成纤维还是成纤维样吞噬细胞呢？实际上我们在表征的时候呢，呃，这个巨噬细胞它转化成为这个MMT的这种形貌的时候，它可能是介于呃完全转换和这个成纤维样的巨噬细胞中间的，那这个在研究不同种的这个，这个去分析的时候，可能它的这个。

嗯，完全纤维化和部分纤维化也代表了它的一个状态，这个是我的个人理解。嗯，好的，那我们下一个问题是。让我来看一下哈。有小伙伴问，GK和s stat通路主要极化为什么型呢？嗯，这个是这个影响他极化的主要的一个信号通路，那如果说激活状态下呢，嗯，就是在PPT上，可能我还没有完全看，可能基本上是一个炎症的一个这个M1型信号通路，这个嗯可以。这个结合文献去进行一个呃分析。

好，那我们再看一下，嗯，同学提的其他问题。嗯，请问巨噬在极化成M音时，衰老表情会增加吗？嗯，巨噬细胞端的衰老一般还是可能会研究一些它相应的呃影响到的一些组织细胞的衰老表情，但是M1型知识细胞呢，它其实呃并不一定代表着一个呃衰老的一个表情，它可能更加呃更与这个炎症相关，那可能M1型巨噬细胞它可以诱导很多它相应的细胞进行一个衰老的一个诱导，这个是可能存在的。嗯，然后。嗯，那我们下一个问题是巨噬细胞培养中容易长角，这种时候老师有比较推荐的处理方式吗？嗯，如果是巨噬细胞细的话，然后在培养过程过程当中长长角，那我们会就是认为它这个可能受到了刺激，比如说例如说我们在去培养巨噬细胞的时候，呃，这个细胞我们进行了胰酶消化，刺激到了这个细胞长角，那还有还有可能呢，这个血清啊，它的效果不是很好，然后呢，细胞比较饥饿状态下，它也有可能造成这个长角，所以说我们需要在培养就是细胞的时候给他一个，呃，比较这个经常去换液，然后而且是。

呃，去热这个以热的这种，就是这个培养基去培养，嗯，减少这个对细胞的刺激，这样的一个方式。好，那我们另外一个小伙伴们，在我们刚才介绍的最后一篇文献中的外泌体是起起到了一个怎样的作用呢？哦，在最后一篇文章，我介绍的是一篇关于这个，嗯，就是细胞以外泌体，然后呢，去诱导他极化的一个这样的一个一个一个一篇文章，那这篇文章当当中呢，它是在这个炎症的一个肥胖组织当中呢，它这个肥胖组织细胞呢，它会分泌外泌体，携带了MICHAEL34A这种呃，这种小核酸，那小核酸它作为一个促这个促盐型的小核酸，它促进了巨噬细胞，像M1型巨噬细胞的极化，然后呢，这个是这篇文章当中这个外泌体作为一个，呃。

这个组织细胞间沟通交流的一个介质存在。好的，那我们再看一下其他的问题，嗯，诱导极化后细胞还可以传代吗？嗯，诱导极化当中，我们建议还是诱导极化了之后这个，嗯。这个持续，这个去刺激他，诱导之后再进行传代，实际上是可以。下一个问题是。我让我们看一看。嗯。巨巨噬细胞吞噬作用有哪些方面的实验呢？

嗯嗯，刚才为大家介绍了一个，就是比如说巨噬细胞它研究它吞噬作用的时候啊，一种是通过流噬细胞术的方式去研究，那比如说巨噬细胞它去吞噬一些细菌的时候，我们可以通过荧光标记这种细菌，然后呢，通过流失细胞数去分析，呃，这个巨噬细胞它，呃这个吞噬这个相应的一个这个这个颗粒素的一个巨噬细胞它的一个含量，那也可以通过研究一些巨噬细胞它吞噬的一些这个呃激活状态啊，比如说去研究一些这个NBT实验等等的这种，呃，去研究巨噬细胞吞噬作用的强弱。嗯，下一位小伙伴说研究基因对THPY细胞功能的影响，应该在极化前转染病毒还是激化后呢？嗯，因为TP杠万这个细胞呢，它是单核细胞，那我们如果想要研究单核细胞它的一个相应影响的话，可能还是需要在极化前，那如果需要研究这个他所极化后的一些这个，嗯，表型上的研究呢，需要在极化后研究。

嗯，下一个问题是有动物模型或者是体外模型筛选能抑制M1型巨噬细胞的极化药物吗？嗯，这个我还没有明显的，呃有看到这样的一些文章，那我们其实认为就是呃诱导这个M，呃1型巨噬细胞，像M2型极化，或者是像M1型计划一般还是以这种生长因子，比如说这个。呃，比如说这个或者是脂多糖LPS这样的方式去诱导他计划。嗯。

那我再来挑选几个小伙伴的问题。巨噬细胞的计化检测的方法，表型分子的PCR+WB加流式可以吗？嗯，在检测这个呃巨噬细胞它的极化状态的时候，如果通过QPCR的方式，呃去检测相应的这个M1型和M2型，这个是呃这个文章当中非常常见的方法，那WB呢，去检检测它，比如说表达的一些蛋白呢，其实呃在文章当中并不是很常见，那最常见的还是通过以拉萨的方式啊。这个去检测它的一个极化状态，呃，就是分泌的一些这个细胞因子等等，那通过流失的方法也是很常见的，在这个我研究的研呃这个PPT展示的第一个方法去分析流失细胞数，这个是呃也是非常直观的一种方法。

嗯，那我们再来挑选最后一个问题哈。嗯。老师觉得哪个哪个问题比较有价值呢？那我再来看。嗯。做免疫荧光共标可以说明呃，这个巨噬细胞极化的这个方向问题嘛，这是可以说明的，就是还也是通过免疫荧光的方式，然后去标志性的，呃，标志性的相应的蛋白表达的一个含量，我们去分析相应的巨噬细胞的一个状态，然后这是我最后的一个问题。好，由于我们时间有限呢，本次答疑环节我们就到此结束了，各位小伙伴问题的问题我们也会后续整理下来，然后会让老师一一的进行解答，我们后续呢，也会在我们的比如说我们的MC一直机公众号平台，或者是我们的视频号萌家学堂上进行一个公布，嗯，小小伙伴们可以去那里进行一个观看，或者是联系我们的销售，我们销售再联系我们的技术人员给您一个详细的解答。

那我后面呢，继续我们的内容啦。嗯，非常感谢啊，今天邵老师的精彩分享，也感谢每一位参与直播的观众，本次直播呢即将结束，想要观看回放的朋友呢，可以先关注我们的MCE一直记公众号，在后台回复MCE直播可以找到我们的回放链接，也可以直接关注我们MCE视频号，所有往期直播的回放内容和相关产品信息都可以在我们MCE的官网上嗯，搜索萌家学堂板块中找到我们萌家学堂板块呢，在右上角的活动中心点击萌家学堂或者是扫描我们屏幕中的二维码直达，同时别忘了关注我们MC的啊小红书账号MC中国嗯，每个月都有精彩纷呈的福利活动和干货分享等你来参与和发现哦，以及如果您有任何关于产品的咨询定制的需求，或者是售前售后问题以及合作的事宜呢，欢迎您随时来联系我们，那我们再次感谢大家的参与，我们下次直播再见啦。

那那我们下次直播就是我们的下周二，也欢迎各位小伙伴们来我们的MC啊视频号上预约下次的直播，到时候会提醒大家，那我们下次直播呢，提前给大家放个彩蛋，就是有关我们天然产物课题的，所以大家记得要观看我们下周二也是下午2点的直播，那么本次直播就到此结束啦，各位小伙伴们拜拜。