sirna转染的实验步骤技巧_sirna转染实验原理原创

Rnai是一种高度保守的细胞机制，其中ago家族蛋白结合小RNA，通过小RNA和靶RNA之间的序列互补性触发把RNA的降解。2006年，美国科学家因揭示RNA干扰机制荣获诺贝尔奖，标志着基因调控的新时代。S sir RNA作为一种关键的小RNA分子，能够触发rnai，通过将其转染入细胞中，可有效抑制目标基因表达。在进行sirna转染实验之前，我们要先准备好sirna和转染试剂。Sirna的设计通常遵循以下原则，随后通过化学合成、体外转录等方式制备相应的s sirna.对于易转染细胞MC，推荐使用传染试剂HIK2017，可高效率传染s hina mirna. 面对男转染细胞，如原带细胞、干细胞及B细胞系，可考虑选择电穿孔法。

准备好sirna和转染试剂后，小M带你来操作一遍如何进行s sir RNA转染，转染前请确保细胞密度事宜60%~80%，并提前一天接种。制备传染复合物时，将SIRNA与转染试剂在无血清培养基中稀释并混合，室温敷育15~30分钟，随后向细胞中加入转染复合物和无血清培养基。转染后细胞培养24~96小时即可收样检测。值得注意的是，最佳传染条件因细胞类型和培养条件不同而有所区别，可做预实验，摸索最佳传染比例。为了满足广大研究者对基因功能探索的需求，Mce精心打造了涵盖16000加基因的预设g s sir RNA套装。每个套装包括针对靶基因的不同区域设计的3对ina，附赠阴性对照、阳性对照、am标记阴性对照共计6对，确保实验的全面性与准确性。

我们承诺在标准使用条件下，转染效率80%以上，至少有一对s sirna能实现70%以上的MRNA沉默效率。为了最大化实验效果，我们推荐将3对s sirna分别转染至细胞中，通过比较其沉默效果，优选效果最优者进行后续研究。此外，小M总结了s ina常见问题与建议，可供小主参考并应用，希望能对您的研究工作有所帮助。在探索基因的奇妙之旅上，别忘了带上小M的开学惊喜，精选16000家基因的预设g s ina套装，现享六五折特惠，活动持续到2024年11月20日，让我们一起揭开基因的神秘面纱，记得点赞关注哦。