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Methods | SAVER: 单细胞RNA测序的基因表达恢复

尽管观察到的许多零计数都反映了真正的零表达,但是相当大的一部分是由于诸如捕获和测序效率之类的技术因素造成的虚假的零表达。...鉴于很难确定每个细胞中mRNA的实际数量,本实验对四个数据集进行了下采样实验,以生成真实的基准数据集。对于每个数据集,首先选择具有高表达的基因和细胞子集作为参考数据集,将这些表达水平视为真实表达。...下采样后,检测到的差异表达基因的数量比参考数据要少得多,但SAVER在下采样数据集中检测到了最多的基因,同时保持了准确的错误发现率 (FDR) 控制 (图2c)。...即使使用先前发布的数据集获得的SAVER的Jaccard指数仅比观察的数据集略高,但t-SNE图显示,细胞的SAVER聚类比观察的数据更准确地表示了参考数据分布。...SAVER还可以在不同数量的主成分上产生更稳定的结果。 最后,使用SAVER分析了小鼠视觉皮层数据集,其中通过广泛分析将47,209个细胞分为主要细胞类型和亚型。

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跟着存档教程动手学RNAseq分析(三):使用DESeq2进行计数标准化

img 除了许多不关心因素之外,每个基因的比对reads计数与RNA的表达成正比。标准化是对原始计数值进行缩放以解释无关因素的过程。通过这种方式,表达水平在样本之间和/或样本内部更具有可比性。...因此,我们不能直接比较sampleA和sampleB中XCR1(或其他基因)的计数,因为样本间归一化计数的总数是不同的。...匹配元数据和计数数据 我们应该始终确保示例名称在两个文件之间匹配,并且示例的顺序正确。如果不是这样,DESeq2将输出一个错误。...创建DESeq2对象 Bioconductor软件包通常在R中定义和使用一个自定义类来存储数据(输入数据、中间数据和结果)。这些自定义数据结构与列表相似,因为它们可以包含多种不同的数据类型/结构。...生成Mov10标准化计数 下一步是标准化计数数据,以便能够在样本之间进行公平的基因比较。

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    广义线性模型应用举例之泊松回归及R计算

    考虑到R. cataractae丰度是一组计数型变量,由离散型的非负整数组成(非连续型变量,比较特殊),不妨首先观测一下R. cataractae丰度变量的分布特征。...),实际使用时参考文献中的方法描述以及自己数据集的特点进行选择即可。...前后两个不同模型(分别为线性回归和泊松回归)的结果比较,区别是非常明显的。那么,哪个结果更合理一些?...准泊松回归基于准泊松(quasi-poisson)分布,计数型变量的分布与泊松分布的均值相同,但方差是均值的w倍。...相比之下,尽管线性回归更通俗直观,但准泊松回归原则上更适用于对此类物种丰度计数型数据的建模,更优先选择。 * 负二项回归 除了准泊松回归,处理偏大离差的另一种方法是使用负二项回归进行建模。

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    重磅综述:三万字长文读懂单细胞RNA测序分析的最佳实践教程 (原理、代码和评述)

    用于scRNA-seq数据的分析工具是用不同的编程语言编写的 - 最主要的是R和Python。尽管跨编程语言的支持越来越多,但使用的编程语言确实影响了对分析工具的选择。...我们在实际的示例工作流程中应用了当前的最佳实践来分析公共数据集。该分析流程使用Jupyter notebook和rpy2整合了R和Python的工具。...尽管reads data和 count data 的测量噪声级别不同 (生信宝典注:基于UMI的数据,获得的是分子计数,count data,噪声更低),但在分析流程中的处理步骤是相同的。...标准化是对细胞计数数据进行缩放处理以使其在细胞之间可比,也可以在基因层面对基因计数进行归一化 (scale)以便于基因内部进行直接比较。...单个基因的表达谱只能在基因空间中进行比较,这一信息存在于测量的数据和校正后的数据中。表达谱可以进行视觉和统计学比较。我们认为视觉比较和统计比较应该在不同的数据层上进行。

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    RNA-seq 详细教程:搞定count归一化(5)

    归一化差异表达分析工作流程的第一步是计数归一化,这是对样本之间的基因表达进行准确比较所必需的。图片每个基因的映射读数计数是 RNA 表达以及许多其他因素的结果。...归一化是调整原始计数值以解决“无关”因素的过程。以这种方式,表达水平在样本之间或样本内更具可比性。在归一化过程中经常考虑的“无关”因素:1.1....基因长度计算基因长度对于比较同一样本中不同基因之间的表达是必要的。...在下面的示例中,基因 X 和基因 Y 具有相似的表达水平,但映射到基因 X 的读数数量将比映射到基因 Y 的读数多得多,因为基因 X 更长。图片1.3....因此,我们不能直接比较样本 A 和样本 B 之间 XCR1(或任何其他基因)的计数,因为样本之间的归一化计数总数不同。

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    RNA-seq 详细教程:搞定count归一化(5)

    归一化 差异表达分析工作流程的第一步是计数归一化,这是对样本之间的基因表达进行准确比较所必需的。 Normalization 每个基因的映射读数计数是 RNA 表达以及许多其他因素的结果。...归一化是调整原始计数值以解决“无关”因素的过程。以这种方式,表达水平在样本之间或样本内更具可比性。 在归一化过程中经常考虑的“无关”因素: 1.1....基因长度 计算基因长度对于比较同一样本中不同基因之间的表达是必要的。...在下面的示例中,基因 X 和基因 Y 具有相似的表达水平,但映射到基因 X 的读数数量将比映射到基因 Y 的读数多得多,因为基因 X 更长。 Gene length 1.3....因此,我们不能直接比较样本 A 和样本 B 之间 XCR1(或任何其他基因)的计数,因为样本之间的归一化计数总数不同。

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    SAS,Stata,HLM,R,SPSS和Mplus分层线性模型HLM分析学生受欢迎程度数据|附代码数据

    p=10809 本文用于比较六个不同统计软件程序(SAS,Stata,HLM,R,SPSS和Mplus)的两级分层线性模型的过程和输出 下面介绍的六个模型都是两级分层模型的变体,也称为多级模型,这是混合模型的特殊情况...此比较仅对完全嵌套的数据有效(不适用于交叉或其他设计的数据,可以使用混合模型进行分析)。尽管HLM软件的网站声明可以用于交叉设计,但这尚未得到确认。...下面的SAS,Stata,R,SPSS和Mplus中使用的过程是其多层次或混合模型过程的一部分,并且可以扩展为非嵌套数据。 但是出于比较的目的,我们将仅研究完全嵌套的数据集。...但是,重要的是要意识到,方法的选择会影响随机因素的估计,标准误差和p值,并且可能会影响宣布随机因素是否重要的决策。SAS,HLM,R和SPSS默认使用REML,而Stata和Mplus使用ML。...示例数据集 流行的数据集由来自不同班级的学生组成,并且由于每个学生都属于一个唯一的班级,因此它是一个嵌套设计。因变量是“流行”,它是一个自评的流行度,范围为0-10。

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    使用SAS,Stata,HLM,R,SPSS和Mplus的分层线性模型HLM

    p=10809 简介 本文档用于比较六个不同统计软件程序(SAS,Stata,HLM,R,SPSS和Mplus)的两级分层线性模型的过程和输出。 ...尽管HLM软件的网站声明可以用于交叉设计,但这尚未得到确认。下面的SAS,Stata,R,SPSS和Mplus中使用的过程是其多层次或混合模型过程的一部分,并且可以扩展为非嵌套数据。...但是出于比较的目的,我们将仅研究完全嵌套的数据集。除了HLM(完全由GUI运行)以外,所有程序的下面都包含用于每个模型的代码/语法。我们提供了HLM和SPSS的屏幕截图。...但是,重要的是要意识到,方法的选择会影响随机因素的估计,标准误差和p值,并且可能会影响宣布随机因素是否重要的​​决策。SAS,HLM,R和SPSS默认使用REML,而Stata和Mplus使用ML。...示例数据集 流行的数据集由来自不同班级的学生组成,并且由于每个学生都属于一个唯一的班级,因此它是一个嵌套设计。因变量是“流行”,它是一个自评的流行度,范围为0-10。

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    SAS,Stata,HLM,R,SPSS和Mplus分层线性模型HLM分析学生受欢迎程度数据|附代码数据

    本文用于比较六个不同统计软件程序(SAS,Stata,HLM,R,SPSS和Mplus)的两级分层线性模型的过程和输出 下面介绍的六个模型都是两级分层模型的变体,也称为多级模型,这是混合模型的特殊情况。...此比较仅对完全嵌套的数据有效(不适用于交叉或其他设计的数据,可以使用混合模型进行分析)。尽管HLM软件的网站声明可以用于交叉设计,但这尚未得到确认。...下面的SAS,Stata,R,SPSS和Mplus中使用的过程是其多层次或混合模型过程的一部分,并且可以扩展为非嵌套数据。 但是出于比较的目的,我们将仅研究完全嵌套的数据集。...但是,重要的是要意识到,方法的选择会影响随机因素的估计,标准误差和p值,并且可能会影响宣布随机因素是否重要的决策。SAS,HLM,R和SPSS默认使用REML,而Stata和Mplus使用ML。...示例数据集 流行的数据集由来自不同班级的学生组成,并且由于每个学生都属于一个唯一的班级,因此它是一个嵌套设计。因变量是“流行”,它是一个自评的流行度,范围为0-10。

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    SAS,Stata,HLM,R,SPSS和Mplus分层线性模型HLM分析学生受欢迎程度数据

    p=10809 简介 本文用于比较六个不同统计软件程序(SAS,Stata,HLM,R,SPSS和Mplus)的两级分层线性模型的过程和输出。...尽管HLM软件的网站声明可以用于交叉设计,但这尚未得到确认。下面的SAS,Stata,R,SPSS和Mplus中使用的过程是其多层次或混合模型过程的一部分,并且可以扩展为非嵌套数据。...但是出于比较的目的,我们将仅研究完全嵌套的数据集。除了HLM(完全由GUI运行)以外,所有程序的下面都包含用于每个模型的代码/语法。我们提供了HLM和SPSS的屏幕截图。...但是,重要的是要意识到,方法的选择会影响随机因素的估计,标准误差和p值,并且可能会影响宣布随机因素是否重要的决策。SAS,HLM,R和SPSS默认使用REML,而Stata和Mplus使用ML。...示例数据集 流行的数据集由来自不同班级的学生组成,并且由于每个学生都属于一个唯一的班级,因此它是一个嵌套设计。因变量是“流行”,它是一个自评的流行度,范围为0-10。

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    单细胞转录组差异分析的8大痛点

    许多单细胞差异表达研究在预处理步骤中尝试去除零值膨胀,但这可能会错误地将生物学上有意义的零值(例如由于表达量低或不表达)视为技术假象。...生物学变异: 即使是来自同一类型的细胞,不同个体或不同状态下的细胞也可能表现出显著的生物学变异。 计算复杂性: 处理和分析单细胞数据需要复杂的计算方法和较大的计算资源。...Muscat 中的 MMvst 和 MMpoisson:这些是Muscat包中实现的混合模型,分别在方差稳定转换数据和原始UMI计数上拟合线性混合模型。...作者比较了不同免疫细胞类型,并在不同的场景下评估了各种方法的性能,包括具有显著库大小差异的同质组、库大小相似的同质组和异质组。...数据集涉及8种不同的细胞类型,每个细胞类型分为未刺激对照组和IFN-β刺激组。

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    TPAMI 2024 | 逐点监督下的噪声标注建模

    在图8中,我们可视化了不同噪声水平下学习到的权重函数。随着噪声水平的增加,学习到的函数变得更加陡峭——更多的注释将被分配低权重,因为数据集的不确定性增加了。...通过随机移动注释位置 {4, 8, 16, 32, 64} 像素生成噪声数据集。然后,我们使用不同的损失函数在噪声数据集上训练计数网络。性能如图 10(a) 所示。...位移噪声和遗漏/重复噪声参数的影响:由于噪声水平未知,我们在原始 UCF-QNRF 数据集上进行了不同假设噪声水平参数的实验。...不同计数模型的比较:为了评估所提出的损失函数的有效性,我们将 L2、BL 和 GL 与不同计数模型进行了比较。结果如表 IV 所示。...用所提出的损失训练的模型通常比其他损失函数更好,这证明了噪声建模是一个重要因素。 我们还在 UCF-QNRF 上使用不同的损失函数对方法进行了 5 次重复试验的比较,实验结果如表 V 所示。

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    方差分析与R实现

    a=0.05,因此不能拒绝原假设,我们认为不同水平下的数据是等方差的。...多重t检验 单因素方差分析是从总体的角度上说明各效应的均值之间存在显著差异,但具体哪些水平下的均值存在较人差异无从得知,所以我们要对每一对样本均值进行一一比较,即要进行均值的多重比较。...双因素方差分析及R实现 无交互作用的分析 例: 某商品在不同地区、不同包装的销售数据 ?...有交互作用的分析 R仍然用函数aov()作双因素方差分析,只需将formula改为x~A+B+A:B或x~A*B的形式即可。 例: 不同路段和不同时段的行车时间数据 ?...协方差分析及R实现 为了提高试验的精确性和准确性,我们对除研究因素以外的一切条件都需要采取有效措施严加控制,使它们在因素的不同水平间尽量保持一致,这叫做试验控制。

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    关于什么是单细胞测序的知识整理,ChatGPT会做的更好吗?

    由于这些步骤中固有的可变性,相同单元格的计数深度可能会有所不同。因此,当基于计数数据比较细胞间的基因表达时,任何差异都可能仅仅是由于抽样效应而产生的。...这些方法可能特别适用于基于平板的scRNA-seq数据集,在这些数据集中,每个细胞的计数深度的较大变化可以掩盖细胞之间的异质性。 批次效应和数据整合 当细胞在不同的组中处理时,可能会产生批次效应。...下游分析方法概述 细胞水平分析 细胞水平的分析通常集中于两种结构的描述:聚类和轨迹。这些结构又可以在细胞和基因水平上进行分析,从而形成了聚类分析和轨迹分析两种不同的方法。...还有两种比较好的方法:MAST,limma。它们也有对应的R包。 基因集分析 基因水平的分析方法通常会产生一长串难以解释的候选基因。例如,数千个基因在处理细胞和对照细胞之间可能有差异表达。...为了促进数据在这些工具之间的运行,学者们已经围绕一致的数据格式开发了单细胞平台。目前使用的比较多的有R、Python以及网页工具。

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    【数据分析 R语言实战】学习笔记 第八章 单因素方差分析与R实现

    R中,函数shapiro.test()提供了W统计量和相应P值,所以可以直接使用P值作为判断标准,其调用格式为shapiro.test(x),参数x即所要检验的数据集,它是长度在35000之间的向量。...(2)方差齐性检验 方差分析的另一个假设:方差齐性,需要检验不同水平卜的数据方差是否相等。...R中最常用的Bartlett检验,bartlett.test()调用格式为 bartlett.test(x,g…) 其中,参数X是数据向量或列表(list) ; g是因子向量,如果X是列表则忽略g.当使用数据集时...a=0.05,因此不能拒绝原假设,我们认为不同水平下的数据是等方差的。...8.1.3多重t检验 单因素方差分析是从总体的角度上说明各效应的均值之间存在显著差异,但具体哪些水平下的均值存在较人差异无从得知,所以我们要对每一对样本均值进行一一比较,即要进行均值的多重比较。

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    R语言基于决策树的银行信贷风险预警模型|附代码数据

    决策树决策树(Decision Tree)是用于分类和预测的主要技术,它着眼于从一组无规则的事例推理出决策树表示形式的分类规则,采用自顶向下的递归方式,在决策树的内部节点进行属性值的比较,并根据不同属性判断从该节点向下分支...相关视频**拓端,赞24**拓端,赞15预警方案设计数据在进行操作的过程中,我们一共分了四步,分别是数据分析和分离数据集,建立训练数据集决策树,评估模型性能,提高模型性能。...这些决策看似没有逻辑意义,但其实它们可能反映了数据中的一个真实模式,或者它们可能是统计中的异常值。...建议现今,我国的生活水平逐步提升,个人的消费水平也跟着上升,但仍有很多人的工资薪酬涨幅跟不上消费的增长,就会从商业银行贷款作为经济生活维持,已提升自己的生活水平,不仅是车辆按揭贷,房产按揭贷款,教育助学贷款...R语言中使用线性模型、回归决策树自动组合特征因子水平R语言中自编基尼系数的CART回归决策树的实现决策树算法建立电信客户流失模型R语言用rle,svm和rpart决策树进行时间序列预测python在Scikit-learn

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    综述:高维单细胞RNA测序数据分析工具(上)

    值得注意的是,UMI中的测序错误可以人为地提高基因表达,因为应该被消除的重复序列被视为了不同的分子。相反,不同的分子可能会被错误地标记为具有相同的UMI序列,从而被视为同一个分子。...对于大多数测序技术,背景RNA污染和测序错误会导致大量的cell barcode,它们的reads数很低,但与真正的细胞并不对应。...然而,这种策略只有在数据集包含离散的细胞类型而不是连续的细胞轨迹时才可行。 数据集之间的QC阈值可能不同,一些探索性的数据分析,如每个细胞或基因UMIs分布的直方图,可以帮助设置每个数据集的阈值。...1.3 Data normalization 在每个细胞中捕获的RNA的比例可能因逆转录效率、引物捕获效率以及与collapsing的UMIs相关的错误等因素而有所不同。...所有细胞的UMI或read计数可以通过除以大小因子来标准化,从而可以比较不同细胞间的基因表达水平。

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    单细胞RNA-seq数据分析最佳实践(上)

    scRNA-seq 数据的分析工具用各种编程语言,最突出的是 R 和 Python (Zappia et al,2018)。...在这里,我们在一个实际的示例工作流中应用了当前的最佳实践来分析公共数据集。分析工作流程用rpy2在 Jupyter-Ipython notebook中集成了 R 和 Python 工具。...一个barcode可能错误地标记多个细胞(双联体)或可能不标记任何细胞(空滴/孔)。虽然reads和计数数据的测量噪声水平不同,但典型分析流程中的处理步骤相同。...这些增加的环境计数会扭曲下游分析,如标记基因鉴定或其他差异表达检测,尤其是当样本之间的水平变化时。...通常,从允许的质控阈值开始,在执行更严格的质控之前研究这些阈值的影响是有益的。这种方法对于包含异质性细胞群的数据集特别重要,其中细胞类型或状态可能被错误解释为低质量离群细胞。

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    Microbiome: 标准化和微生物差异丰度策略取决于数据特征

    DESeq2在较小数据集(的灵敏度增加,但随着样本的增加、库的不均匀度(~10×)和组成效应,趋向于更高的错误发现率。...为了减轻这三个挑战中的一些并帮助数据解释,数据通常在下游分析之前通过各种计算过程进行标准化。标准化是对数据进行转换的过程,目的是通过消除人为因素,准确比较不同测量的统计数据。...例如在微生物组数据中,由于样本收集、文库制备和/或测序的差异,可能存在偏差,并且可能表现为例如不均匀的采样深度和稀疏性。在有效的标准化之后,来自不同样本的数据可以相互比较。...考虑到计数数据中额外的泊松变化,泊松参数通常由伽马分布建模,因此边际计数分布为负二项式(NB)。尽管NB模型考虑了额外的泊松变化,但当有许多零点时,它并不能很好地拟合数据。...在β多样性分析中,不标准化和样本取比例的方法容易产生基于测序深度的人为因素聚类。 因此,如果计数数据不稀薄,研究人员应该谨慎进行,并检查排序结果中的这些因素的影响。

    2.6K21

    分辨真假数据科学家的20个问题及回答

    由于回答人不同,这二十个答案和上一部分的内容可能不会一一对应,但相信你还是可以得到想要成为数据科学家的知识。...如果数据集很小,就要使用 jackknife resampling技术,并用R平方和MSE(mean squared error)来测量效度。...举例来说,如果有100个测试样本,分别由60/20/15/5分成四类组成,但实际的训练样本中每类实例数量又是接近的,那么模型有可能给出错误的假设—每类占比是决定性的预测因素。...设计的选择要基于目标的类型(比较、筛选、响应面)[原文:Comparative, Screening, Response surface]和因素(factors)的个数。...针对高数据和宽数据的不同方法 问题不仅仅是变形(reshape)数据(这里有R包 useful R packages),而是通过减少特征数来寻找最相关的特征,以避免假阳性(false positives

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