在新药安全评价过程中,我们有时会发现牙齿及牙周组织是一些新药的靶器官,给药后,会观察到动物牙齿及牙周结构被一定程度地破坏。
全面检查牙齿及牙周组织并发现病变的前提是制作优质的组织切片。 尽管牙齿和骨头一样,都含有较高成分的钙盐。但是,假如采用相同的脱钙条件处理后(如30%-50%甲酸溶液脱钙),你常常会发现骨头(如动物股骨)已变软可切,而牙齿还是很硬。要知道,牙釉质钙含量高达97%,又硬又脆。 这种情况下,很多人会选择二次脱钙后再制作切片。
常规的骨组织切片如动物股骨或者胸骨,脱钙造成的局部组织结构缺损是不会对病理诊断造成太大影响的。
然而采用常规脱钙液处理后的牙齿,制出的切片有一个很大问题。就是牙齿中的精细结构会被破坏,显微镜下见牙釉质、牙本质、成牙釉质细胞层和成牙本质细胞层出现明显的结构破坏,这些现象会对观察、诊断造成极大的影响。 尤其是需要进行组间比较时,这种人工处理造成的干扰会非常明显。
显然,常规的脱钙液不适用牙齿脱钙。
那么有没有更好用的脱钙液呢? 当然有。 经过多方查证发现,一种名叫Plank的混合脱钙液更加适合对牙齿及牙周组织进行脱钙处理。 Plank混合脱钙液配制方法: 7g氯化铝+8.5ml盐酸+5ml甲酸+蒸馏水定容至200ml (注:引用自《病理技术大讲堂1001问》,席越、陈军,北京大学积水潭医院病理科。) 铝离子可起到温和的脱钙作用,可保护组织结构不被破坏,同时它也是常规染色物质的助染剂,可使染色更鲜亮,对比度更高。冰醋酸可以减少酸对组织结构的破坏。 脱钙时间在2-3天即可。 这种混合脱钙液也非常适合需要进行免疫组化染色的一般骨组织,因为它可以较好地保证组织结构和抗原完整性,染色效果较好。 感兴趣的可以尝试一下。