开发单位:华大,SOAP系列软件套装!
功能:检测融合基因
优点:在现有的各种软件里面表现算是最好的(当时)
算法:是hash index,跟其它bwt算法不太一样
官网:http://soap.genomics.org.cn/soapfuse.html paper:https://genomebiology.biomedcentral.com/articles/10.1186/gb-2013-14-2-r12
其它软件有: FusionSeq [21], deFuse [22], TopHat-Fusion [23], FusionHunter [24], SnowShoes-FTD [25], chimerascan [26] and FusionMap [27]
具体的算法我没看,因为只是有需求,正好有一些RNA-seq数据又想看看样本融合基因情况。所以就测试这个软件,通俗点说,融合基因原理其实很简单,如果有足够多的reads一部分比对到一个基因,另一部分比对到另一个基因,就可以说明它们两个基因发生了融合现象!如果是PE测序,那么更方便,左右两端reads比对情况也可以考虑。我就不多说废话了,直接上操作教程吧!
一,软件安装
软件下载地址:https://sourceforge.net/projects/soapfuse/files/SOAPfuse_Package/SOAPfuse-v1.27.tar.gz
下载压缩包,解压后即可使用!!!
推荐用最新版,然后看作者说明书的时候也要看清楚!
我反正好几次都搞糊涂了,最后联系了作者才搞明白,作者说他想更新到2.0版本,直接用HISAT的比对sam文件来做,但是还在筹备中,我觉得有点悬!(写这个博客说这句话的时候是2016年,现在是2018年了,果然,作者没有兑现他的承诺)
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解压后是一堆perl程序,都在source目录下,source目录下面还有bin下面附带了几个第三方软件,包括bwa,blast和soap,最后都用得着!
有个很重要的问题,一定要软件自带的perl模块添加到perl的环境变量。不然那些perl程序运行会报错!
配置文件需要修改,就把几个目录放进去即可。
二,输入数据准备
这里最重要的就是制作数据库!!!
作者给了非常详细的制作过程,我觉得还是不够清楚,所以再讲一遍!
https://sourceforge.net/p/soapfuse/blog/2013/07/strategy-for-recurrent-transcriptname-and-genename-in-ensembl-gtf-file
首先下载5个文件:
文件下载地址,作者已经给出了!
我把这些文件都放在的当前文件夹下面的raw这个子文件夹,作为该软件的database文件夹!!!
然后运行命令!(那个时候写教程比较粗略,这句话其实有歧义)
我在SOAPfuse-v1.27文件下面运行:
这一步耗时很长,4~6小时,创造了transcript.fa和gene.fa,然后还对他们建立bwa和soap的index,所以有点慢!
构建成功会有提示:
这些目录很重要,接下来制作配置文件会用得着!
配置文件需要修改下面5个
其实你仔细阅读了说明书,你就知道该修改成什么样子了!
最后制作sample list文件
我这里只有一个sample,所以文件就一句话即可
所以我的有下面两个文件,都是为了顺应作者的需求我才搞了test/test/test这么无聊的东西!!!
如果你有多个sample需要一起运行,你就要仔细读作者的readme了,它把这个配置文件搞得特别复杂!!!
三,运行命令
如果文件都准备好了,运行命令非常简单!!
运行的非常慢!!!
因为需要重新比对
四,数据结果解读
结果,作者已经说的很清楚了,我就不多说了!
感谢大家关注生信技能树的融合基因专题,目前为止我们已经介绍的软件如下:
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