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新手实验室必备:大鼠IgG2c免洗板一步法检测试剂盒

通常基于双抗体夹心 ELISA 原理。试剂盒的微孔板上预包被有针对大鼠 IgG2c 的特异性捕获抗体,加入样本和酶标检测抗体后,样本中的大鼠 IgG2c 会同时与捕获抗体和酶标检测抗体结合,形成 “捕获抗体 - 大鼠 IgG2c - 酶标检测抗体” 的夹心结构。然后加入酶底物,在酶的作用下底物发生显色反应,通过酶标仪测定吸光度值,根据标准曲线即可计算出样本中大鼠 IgG2c 的含量。与传统 ELISA 不同的是,免洗板一步法将加样、孵育等多个步骤合并,减少了洗涤步骤,节省时间和操作精力。

优势

操作简便:无需繁琐的洗涤步骤,大大减少了实验操作时间和工作量,降低了因洗涤不充分或过度洗涤导致的误差,新手也能快速上手。

快速检测:一步法操作省略了中间的洗涤和多次孵育等环节,能在较短时间内完成检测,提高了实验效率,适用于需要快速获得检测结果的情况。

高特异性:采用高亲和力的特异性抗体,能够精准识别大鼠 IgG2c,有效避免与其他免疫球蛋白亚型或无关蛋白的交叉反应,确保检测结果准确可靠。

高灵敏度:可以检测到极低浓度的大鼠 IgG2c,对于大鼠免疫反应早期或免疫反应较弱时产生的少量 IgG2c 也能准确检测,有助于研究细微的免疫变化。

良好的重复性:严格的生产工艺和质量控制,保证了试剂盒不同批次之间的稳定性和一致性,实验结果重复性好,便于不同实验之间的数据比较和分析。

操作流程

试剂准备:将试剂盒从冰箱取出,室温平衡 30 分钟左右。根据实验需求,用试剂盒提供的稀释液稀释标准品,准备不同浓度梯度的标准品溶液,用于绘制标准曲线。

加样:将稀释好的标准品和待测样本加入到预包被的微孔板中,同时设置空白对照孔,一般每孔加样量为 50-100μL。然后加入酶标检测抗体,每孔加样量通常为 50-100μL,轻轻混匀。

孵育:将微孔板放入 37℃恒温箱中孵育 30-60 分钟,使抗原抗体充分反应。

显色与检测:孵育完成后,直接向每孔加入酶底物溶液,一般每孔 100μL,室温下避光反应 10-15 分钟,待颜色变化明显后,加入终止液,每孔 50-100μL,终止反应。然后使用酶标仪在特定波长下测定吸光度值,根据标准曲线计算出样本中大鼠 IgG2c 的含量。

应用场景

基础免疫研究:在研究大鼠免疫系统的发育、免疫细胞的功能以及免疫应答机制等方面,可用于检测不同发育阶段或不同免疫状态下大鼠体内 IgG2c 的水平变化,帮助了解免疫系统的功能状态和免疫反应的规律。

疾病模型研究:在建立大鼠疾病模型,如自身免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤疾病等研究中,通过检测 IgG2c 水平,可监测疾病的发生、发展过程,评估疾病的严重程度,以及研究疾病对免疫系统的影响。

药物研发:在开发针对大鼠免疫系统的药物时,用于评估药物对大鼠免疫功能的影响,判断药物是否能调节 IgG2c 的产生,为药物的筛选、剂量优化和疗效评估提供依据。

疫苗研究:在大鼠疫苗研发过程中,检测免疫后大鼠体内 IgG2c 的水平,可评估疫苗的免疫效果,了解疫苗诱导的免疫应答强度和持续时间,为疫苗的研发和改进提供数据支持。

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  • 原文链接https://page.om.qq.com/page/OWX7iDUdMJekxPxJq1IVejSw0
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