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色彩的科学:花青染料在荧光分析中的奇妙之旅

花青染料通常表现出非常大的摩尔吸收率(约150000至300000M-1cm-1)以及适度的量子产率,从而产生及其明亮的荧光信号。事实证明,花青在许多领域都非常有用,包括生物成像细胞学荧光技术分析化学等,对于某些生物学应用,花青可以有利地替代其他常规染料,它们也可以应用在各种生物学。

常见的花青染料

 花青染料中常使用的是发黄绿色荧光的Cy3(Ex:550nm,Em:570nm)和发红色荧光的Cy5(Ex:650nm,Em:670nm)。由于它们具有少量光谱重叠,Cy3和Cy5通常组合为2色检测。Cy3可通过各种荧光仪成像仪器具有TRITC标准滤波片的显微镜来检测。由于Cy5消光系数高,它已成为远红色荧光染料的流行替代品。

   图为Cy3(左)、Cy5(中)、Cy7(右)的激发和发射光谱

表一.花青染料的光谱特性

磺化与非磺化花青染料

 磺化与非磺化花青染料具有非常相似的荧光特性,在许多应用中可以互换使用。它们之间的差异主要在于溶解度。磺化的为水溶性,非磺化的则为脂溶性

表二.磺化与非磺化花青的比较

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