大鼠抗卵清蛋白IgG抗体（OVA-IgG）检测试剂盒操作说明

试剂盒提供了科学高效的工具，用于检测大鼠血清、血浆或其他生物样本中抗卵清蛋白IgG抗体（OVA-IgG）的含量。以下是由优品生物研发的大鼠OVA-IgG抗体检测试剂盒的详细使用说明，旨在帮助实验人员正确使用试剂盒，并确保数据的准确性和可靠性。

一、试剂盒简介1. 产品用途

本试剂盒特异性检测大鼠体内抗卵清蛋白IgG抗体的浓度，适用于免疫学研究、疫苗评价、抗体动力学研究以及其他基础研究领域。

2. 检测原理

本试剂盒采用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）原理：

包被抗原 ：卵清蛋白（OVA）结合于96孔ELISA酶标板。

样本反应 ：待测样本中的IgG抗体与包被抗原特异性结合。

二抗结合 ：酶标二级抗体与抗体-抗原复合物结合后产生显色反应。

显色与定量 ：加入底物显色溶液，通过光密度值（OD450nm）进行定量分析。

二、试剂盒组成

试剂盒包含以下组分：

组分规格（96T）备注酶标板（预包被OVA抗原）1块已包被卵清蛋白抗原标准品（OVA-IgG）6支不同浓度梯度，定量测定酶标二抗（HRP标记）1支抗鼠IgG-HRP样本稀释液1瓶稀释血清或血浆浓缩洗涤液（20×）1瓶检测过程中的洗板操作用显色液（TMB）1瓶与HRP反应后显蓝色，酸终止变黄终止液1瓶停止显色反应封板膜1包防止液体蒸发使用说明书1份详细操作流程

三、样本要求

样本类型

可检测大鼠血清、血浆及其他体液样本（如包含OVA-IgG的培养基上清样本）。

样本采集与保存

血清或血浆样本采集后，需立即冷冻（-20℃或-80℃），避免反复冻融。

建议进行无菌操作，确保样本不被污染。

样本稀释

根据具体实验需求，样本需按1:100或更高比例稀释，以避免信号过强导致不可测。

四、操作步骤

1. 准备

所有试剂、标准品及样本在实验开始前，需置于室温平衡30分钟。

配制1×洗涤液：将浓缩洗涤液（20×）按比例稀释成工作液。

2. 加样

酶标板中每孔加入50 μL标准品或待测样本。

对照孔加入50 μL样本稀释液作为阴性对照。

加入样本后，盖上封板膜，室温37℃孵育30-60分钟。

3. 清洗

孵育结束后，去除液体，并用配制好的洗涤液清洗孔板5次，每次静置10秒。

4. 加酶标二抗

每孔加入50 μL酶标二抗（HRP标记），再次37℃孵育30分钟。

5. 再次清洗

重复清洗步骤5次，去除未结合的二抗。

6. 显色

每孔加入50 μL TMB显色液，避免阳光直射。

室温避光反应15分钟，观察显色变化（浅蓝色呈现）。

7. 终止反应

每孔加入50 μL终止液，溶液变为黄色。

8. 读板

在酶标仪上于450 nm处测定OD值。根据标准曲线计算样本中OVA-IgG的浓度。

五、注意事项

所有样本、标准品及试剂均需按照说明中稀释至适当浓度，避免过高或过低的信号。

在操作过程中严格遵循加样、孵育及洗板时间，确保实验结果的准确性。

实验过程中注意无菌操作，避免交叉污染。

配置洗涤液、显色液时，建议使用去离子水，减少杂质干扰。

酶标仪读取时，确保控制孔值在有效范围内，否则需重复实验。

六、结果解释

标准曲线 ：利用标准品OD值绘制标准曲线，用于计算未知样本浓度。

结果判断 ：如果检测值明显偏低或偏高，需结合实验设计背景综合分析原因。

七、储存条件与有效期

储存条件

未开封试剂盒应置于2-8℃保存，避免阳光直射及反复冻融。

使用后，将未使用完的试剂重新密封保存，用于后续实验。

有效期

产品有效期见外包装标签，请在有效期内使用。

优品生物的大鼠抗卵清蛋白IgG抗体检测试剂盒操作简单，灵敏度高，能够为IgG抗体研究提供可靠的数据支持。若有任何问题或技术支持需求，可随时联系优品生物的技术团队。