实验原理
优品生物的人抗双链DNA抗体(dsDNA-Ab)检测试剂盒采用间接两步法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被双链DNA抗原的微孔酶标板中,加入不同浓度的校准品和待测样本。经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,再加入抗人Ig-HRP(酶标抗体),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗原-抗体-酶标抗体的夹心复合物。加底物A和B,底物在HRP催化下,产生蓝色产物,在终止液作用下,最终转化为黄色。在酶标仪上测定吸光度(OD值),吸光度与待测样品中待测抗体的浓度呈正相关。
试剂盒组成
酶标板
标准品
检测抗体
样品稀释液
洗涤液
底物A和B
终止液
说明书
操作步骤
样本准备:采集并处理待测样本,如血清或血浆。确保样本无污染且保存条件适宜。
试剂准备:将所有试剂恢复至室温。配制工作液,如稀释洗涤液和底物。
加样:在酶标板上设置标准品孔、样本孔和空白孔。标准品孔加入不同浓度的标准品,样本孔加入待测样本。
孵育:将酶标板放入37℃水浴锅或恒温箱中孵育30分钟。
洗涤:弃去液体,用洗涤液充分洗涤板孔,重复4-5次。
加入检测抗体:向标准品孔和样本孔中加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体,再次孵育30分钟。
显色反应:加入底物A和B,孵育15分钟,加入终止液终止反应。
结果测定:在酶标仪上测定各孔的吸光度(OD值),并根据标准曲线计算样本中dsDNA-Ab的浓度。
注意事项
所有试剂和样本在使用前需恢复至室温。
使用一次性吸头以避免交叉污染。
严格按照规定的时间和温度进行温育。
试剂盒仅供科研使用,不得用于临床诊断。
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