在进行微生物限度检验时,滤膜孔径的选择需要综合多方面因素考虑,以下为你详细介绍:
依据检测目的
检测细菌总数时:通常选择孔径为 0.45μm 的滤膜。大部分细菌的个体大小一般大于 0.45μm,这种孔径的滤膜能够有效地截留细菌,使细菌被截留在滤膜表面,便于后续通过培养等方式进行观察、计数,从而准确检测样品中细菌的数量情况。
检测真菌总数时:真菌的细胞大小差异相对较大,但一般来说选择 0.45μm 孔径的滤膜也基本能满足要求,可将真菌孢子以及菌丝片段等截留,利于后续在相应培养基上培养并统计真菌数量。不过对于一些菌丝较为粗大的真菌,有时也可考虑使用孔径稍大一点如 0.8μm 左右的滤膜,确保既能截留真菌又能尽量减少对过滤速度等的影响。
检测特定微生物时:若要检测如支原体等较小的微生物,0.45μm 的滤膜无法有效截留它们,因为支原体直径一般在 0.1 - 0.3μm 左右,此时就需要选择孔径更小的滤膜,例如 0.22μm 的滤膜,以保证能将目标微生物截留进行检测。
考虑样品特性
样品的浑浊程度:如果样品较为浑浊,含有较多的杂质颗粒等,选择相对较大孔径的滤膜(如在符合微生物截留要求的基础上选择 0.8μm 等),可以在一定程度上加快过滤速度,避免因杂质过多很快堵塞滤膜而导致过滤难以顺利进行。不过大孔径滤膜一定要保证能有效截留需要检测的微生物种类。
样品的成分性质:像含有一些黏性成分(如部分多糖类、蛋白质含量较高的样品)的样品,过滤时容易黏附在滤膜上,这种情况下更适宜选择孔径稍大一点的滤膜(比如 0.8μm 左右),同时可搭配适当的冲洗液来帮助过滤,减少滤膜堵塞风险,同时保障微生物截留效果。
遵循法规标准要求
不同的行业、不同的检测项目对应有不同的法规和标准规范,例如药品微生物限度检测、食品微生物检测等领域都有相应官方制定的标准文件。在进行具体检测时,要严格按照这些标准中对于滤膜孔径的规定来选择,以确保检测结果的准确性、合规性以及结果之间的可比性。例如我国现行的《中国药典》对于药品微生物限度检验中常规的细菌、真菌检测就明确规定常采用 0.45μm 孔径的滤膜,检验人员就需要依规选用。
参考过往经验及预实验结果
过往检测经验:如果长期进行某类样品的微生物限度检验,且以往选择的某一孔径滤膜一直能稳定且准确地实现微生物截留和检测,那么可以继续沿用该孔径的滤膜。
预实验判断:对于一些新的、成分较为特殊的样品,可先进行小规模的预实验,分别试用不同孔径的滤膜(如 0.45μm、0.8μm 等)进行过滤集菌,观察过滤的顺畅程度以及微生物截留情况,对比后选择最为合适的滤膜孔径用于正式的检测。
领取专属 10元无门槛券
私享最新 技术干货