注意！出凝血实验中的那只“猫”

作者：王崇[1]刘增宾[1]王丽娴[2]

单位：[1]河北医科大学第二医院鹿泉院区检验科

[2]河北医科大学第一医院法律事务部

凝血酶生成潜力实验（Calibrated Automated Thrombogram,CAT）又叫“校准的自动凝血酶生成图”，英文简称是“CAT”，我们暂且称它是出凝血实验中的那只“猫”。因为CAT实验开展的医院不是很多，也没有标准收费，所以很多人不熟悉。

我在反复学习“血栓与止血百家争鸣大讲堂”第65期赖建禧老师的课件《凝血酶生成实验与传统凝血项目的机制差异》后，认为这是一个非常有临床意义的实验，感觉有必要做一下普及。

CAT实验原理：37℃条件下，在经特殊蛇毒处理过的乏纤维蛋白原血浆中加入少量组织因子TF（tissue factor）和钙离子，模拟体内正常的“外源点火、内源放大”的止凝血过程，TF刺激生成少量的凝血酶，正反馈激活凝血因子FV、FVIII、FXI，循环放大，使凝血酶大量生成，后者作用于特异的荧光底物使其发出荧光，荧光强度与凝血酶生成量成正相关，经描记凝血酶生成过程形成的曲线下面积，用于评估凝血酶生成潜力。见图1[1]

一、CAT实验指标临床意义

1、延迟时间：（lag time）：指反应开始至凝血酶开始生成的时间，单位为分钟。

2、达峰时间（time to peak）：指反应开始至凝血酶生成至峰值所用的时间，以分钟表示。

3、峰值（height）：指最大凝血酶生成量，经标准品校准后，该参数以浓度表示（nM）。

4、凝 血 酶 生 成 潜 力（endogenous thrombin potential，ETP）：即凝血酶生成曲线下面积，代表在促凝和抗凝双重因素作用下，被测血浆能够生成凝血酶的净量。

二、CAT实验几点特殊性

1、试剂中“少量”的TF：CAT实验尽量模拟体内生理性止凝血过程，试剂中加入的TF是少量的，就是要通过模拟体内“外源点火、内源放大”（见图2）的过程来检测凝血酶的生成过程。即：少量的TF激活外源性凝血途径后，生成少量的凝血酶，凝血酶反馈激活FV、FVIII因子，实现凝血酶生成的正反馈循环，进而生成大量的凝血酶。

（图2）

2、乏纤维蛋白原血浆：CAT实验原理为发色底物法，与其他以凝固法为实验原理的出凝血实验不同，CAT实验要求样本不能凝固，必须要预先用特殊蛇毒对血浆样本进行处理，使之成为乏纤维蛋白原血浆。

3、CAT实验又不完全与体内生理性止凝血过程相同

（1）CAT实验还是以血浆为样本的实验，并非全血实验，没有RBC及PLT的参与，与以“细胞学为基础的止凝血理论”不一致，尽管尽力去模拟，但仍有不同。

（2）CAT实验以发色底为法为实验原理，样本为乏纤维蛋白原血浆，没有天然的作用底物纤维蛋白原，实验过程中生成的凝血酶只能与抗凝血酶、特异荧光底物进行反应，没有PLT聚集提供的反应平台，会很快被抗凝血酶抑制，不能体现凝血酶的最大储备功能。众所周知，正常血浆样本中的凝血储备是远远高于抗凝能力的，否则离体的血标本就不会自然凝固！以凝固反应为实验原理的实验，仅消耗掉5%的凝血酶储备便可使血浆完全凝固[2]。

4、CAT实验可根据实验目的不同，设计出不同的试剂组合，见（表1）

5、CAT与传统出凝血实验的异同

备注：1、血栓弹力图（Thrombelastograghy，TEG）2、凝血酶原时间（Prothrombin Time，PT）3、活化部分凝血酶时间（Activated partial thromboplastin time APTT）4、乏血小板血浆（platelet poor plasma，PPP）

【参考文献】

1、胡加萍，宗晓龙.凝血酶生成实验检测技术及临床应用进展[J].血栓与止血学，2023，29（6）:288-292

2、武艺，鲁翌，叶絮等.凝血酶生成检测的应用现状与发展[J].血栓与止血学，2022，28（4）：1123-1129

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编辑：小冉  审校：yeah