揭示TAOK3和SHP-1在T细胞的激活作用——蛋白的分离和纯化

"TAOK3对SHP-1丰度的调节作为T细胞受体（TCR）信号的调节器，决定了T淋巴细胞的激活阈值"

在识别调节T细胞激活的途径方面已经投入了大量努力。

在这些途径中，因为在调节细胞增殖和凋亡方面的作用，以及其在T细胞的多种功能中的参与，如免疫突触的形成和T淋巴细胞的记忆，使得Salvador-Warts-Hippo（SWH）途径而脱颖而出。这条途径涉及多个家族的蛋白激酶。

除了这条途径的核心酶之外，本文聚焦于TAOKs（thousand-and-one amino acid kinases）和SHP-1（图1）。因此，TAOK3对SHP-1丰度的调节作为T细胞受体（TCR）信号的调节器，决定了T淋巴细胞的激活阈值。

研究结果表明，TAOK3是一种对TCR信号至关重要的丝氨酸和苏氨酸激酶。它的缺失导致TCR信号减少，并且酪氨酸磷酸酶SHP-1与激酶LCK的相互作用增加，LCK是TCR信号的关键下游介质（图1B）。

图1.A：SHP-1-TAOK3相互作用模型结构和实验确定的相互作用位点。 图1.B：TAOK3介导的SHP-1降解和TCR信号调节模型。

为了得出这一结论，该研究的科学团队进行了精确的分子和生化分析。在这些步骤之前，以最佳方式分离研究酶是至关重要的，以便获得最可靠的结果。

科学家团队使用来自ABT（Agarose Bead Technologies）的4% B Agarose Beads (50-150 μm) [A-1040S]，用于纯化和分离目标蛋白。

ABT的这种琼脂糖微球在免疫沉淀（IP）过程中用于分离与T细胞受体信号和T细胞中TAOK3功能相关的特定蛋白质。

选择适当的方法以达到尽可能高的纯度至关重要，这对于进行科学有效的研究是必不可少的。

ABT的琼脂糖的有效性、特异性和分选性在目标蛋白纯化和分离的实验过程中获得结果的可重复性和可靠性中起到了至关重要的作用。

参考文献：

1. Poirier A, Ormonde JVS, Aubry I, Abidin BM, Feng CH, Martinez-Cordova Z, Hincapie AM, Wu C, Pérez-Quintero LA, Wang CL, Gingras AC, Madrenas J, Tremblay ML. [The induction of SHP-1 degradation by TAOK3 ensures the responsiveness of T cells to TCR stimulation.](https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38166031/)Sci Signal. 2024 Jan 2;17(817):eadg4422. doi: 10.1126/scisignal.adg4422. Epub 2024 Jan 2. PMID: 38166031.

2. Figure 1A. SHP-1–TAOK3 interaction model based on AlphaFold structures and experimentally defined interaction sites. (Fig. 6. From The induction of SHP-1 degradation by TAOK3 ensures the responsiveness of T cells to TCR stimulation)

3. Figure 1B. Model for TAOK3-mediated SHP-1 degradation and regulation of TCR signaling. (Fig. 7. From The induction of SHP-1 degradation by TAOK3 ensures the responsiveness of T cells to TCR stimulation)