Neutral protease from paenibacillus polymyxa | 分散酶 _ MCE

中文名：分散酶

CAS：42613-33-2

品牌：MedChemExpress (MCE)

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生物活性：Neutral protease from paenibacillus polymyxa (Dispase II) 是一种中性蛋白酶和有效的的纤连酶和 IV 型胶原酶。Neutral protease from paenibacillus polymyxa 可用于将完整的表皮与真皮分离，并将培养物中的完整上皮片与基质分离。

体外：使用方法1、溶液配制1）用 DPBS 缓冲盐溶液（无钙镁离子）溶解适量本品冻干粉，配制成 10 mg/mL 的储存液，用 0.22 μM 滤膜过滤除菌。2）使用时用 DPBS 将上述储存液稀释到工作液浓度即可，用于细胞分离时其常用工作浓度为 0.6-2.4 U/mL。注：不推荐使用高于 2.4 U/mL的工作浓度。2、组织的解离1）用无菌的小刀或者剪刀将组织剪成 3-4 mm的组织块；2）用无菌 PBS 清洗组织块；3）向组织块中加入 Dispase II 溶液（工作浓度为 0.6-2.4 U/mL），并确保组织块全部浸没于 Dispase 溶液中。4）37℃ 孵育，孵育过程缓慢搅拌直至组织块全部解离。注：一般对于较难解离组织，1h即可达到分离目的，但更长时间（如数小时）的孵育也不会明显影响细胞活性。5）如有需要，可将上述消化产物通过无菌不锈钢网筛过滤，以分开单细胞与残留的组织块。或者待大块组织沉淀后轻轻倒出上层细胞，若是需要，换用新鲜 dispase 溶液以进一步解离残留组织。6）离心沉淀细胞，倒掉酶溶液；7）用培养基重悬细胞沉淀，并于常规条件下培养细胞。3、细胞传代1）利用 Dispase 溶液（37℃预热）浸没细胞，于 37℃孵育5 min；2）吸除上述溶液，继续于 37℃孵育 10 min；3）显微镜下观察细胞分离情况，如需要，可进一步孵育 15 min；4）利用细胞培养基悬浮细胞，轻轻旋转使得细胞沉淀用培养基清洗细胞；5）换用新鲜细胞培养液重悬细胞，并按常规方法进行细胞铺板。 MCE has not independently confirmed the accuracy of these methods. They are for reference only.

参考详情：https://www.medchemexpress.com/dispase.html

参考文献：

[1]. Stenn KS, et al. Dispase, a neutral protease from Bacillus polymyxa, is a powerful fibronectinase and type IV collagenase. J Invest Dermatol. 1989 Aug;93(2):287-90.

[2]. Calvo B, et al. Dissociation of neonatal and adult mice brain for simultaneous analysis of microglia, astrocytes and infiltrating lymphocytes by flow cytometry. IBRO Rep. 2020 Jan 13;8:36-47.