斑马鱼行为篇（84）：斑马鱼慢性不可预测压力应激模型

重点推荐

动物模型在研究压力相关疾病的病理机制中被广泛使用。斑马鱼作为一种相对较新的模型生物，因其与人类在遗传和生理上的高同源性，尤其是在神经递质系统和中枢神经系统形态上的保守性，而在压力神经科学研究中变得越来越有价值。利用5周的慢性不可预测压力（CUS）模型，可研究了成年斑马鱼的大脑转录组特性、复杂动态行为压力反应，以及神经化学变化。总体而言，CUS在斑马鱼中诱导了复杂的神经化学和行为改变。

斑马鱼CUS造模：

实验中的鱼被放置在4升的水族箱中（每箱20条鱼），并且在11周的时间里每天接受各种压力源的挑战，包括拥挤（每升水10条鱼）在20升的水桶中6小时，1分钟的空气暴露（通过网将鱼从水箱中捞出并暴露在空气中），网捕追逐，冷却（降至10°C），轻微的低温（22°C）和高温（35°C）在5升的罐子中，3杯拥挤压力（0.5升杯中12条鱼），群游（每NTT放置4-5条鱼），捕食者或捕食者水暴露（从捕食者家中水族箱收集的水，经过7天的住房），暴露于不同的斑马鱼品系，对新物体（35个塑料玩具），光暗箱，浅水（30-60%的正常水位），300-lux的明亮和1500-lux的超亮光（由两个60瓦的灯泡分别放置在水面上方20或2厘米处产生），电击（0.1 V/cm），噪音（50分贝钻孔声），摇晃/涡流30秒（每50毫升管中10条鱼，转速为1000 rmp），警报信息素暴露（0.5 mL/L），社交隔离（每90毫升塑料杯中1条鱼），食物剥夺和黑暗。

斑马鱼条件位置厌恶测试：

CPA装置是一个塑料长方形水槽（长12厘米，宽25厘米，高14厘米），被分成两个等大小的黑色和浅色隔间，里面装满了水。在黑暗部分，两块金属板相对附着，连接到一个定制的电流发生器（0.1 V/cm）。在CPA测试的第一天，通过将10条鱼的群体放置在CPA水槽中4小时，并打开发生器，向装置的黑暗部分供电来训练鱼。在第二天，每条鱼在从家中水族箱取出后立即分别记录5分钟，此时电流发生器是关闭的。使用相关软件评估鱼在“偏好”的浅色区域与“受罚”的黑暗区域所花费的时间。

斑马鱼尾部固定（ZTI）测试：

ZTI测试用于表征成年斑马鱼的压力和药物效应，类似于啮齿动物的绝望行为测试，并且对急性压力源和抗抑郁治疗都具有双向敏感性。鉴于绝望行为与啮齿动物的慢性压力之间复杂的相互作用，特别是评估CUS对斑马鱼在ZTI测试中行为的影响。每条鱼的尾部被固定在湿润的粘胶海绵中6分钟（海绵尺寸为8厘米长×4厘米高×5厘米宽，从底部向下2厘米深处用锋利的手术刀切开），并用两个额外的2厘米海绵片在两侧固定在烧杯的顶部，以便通过烧杯壁固定。鱼体的前部因此可以自由地垂直悬挂在装满水的小烧杯中（一个7×5.5-4.8厘米的透明塑料杯，形状为截断的圆锥形）。试验使用动作摄像机以每秒60帧的速度进行录像，以评估主动逃生尝试的总持续时间（秒），这些尝试被定义为连续的身体扭转运动，彼此之间由不动的时期隔开-身体运动完全停止，除了鳃和眼睛的运动，每次持续时间超过2秒。

往期推荐

参考文献：

Demin, K.A., Kolesnikova, T.O., Galstyan, D.S. et al. Modulation of behavioral and neurochemical responses of adult zebrafish by fluoxetine, eicosapentaenoic acid and lipopolysaccharide in the prolonged chronic unpredictable stress model. Sci Rep 11, 14289 (2021).

Demin, K.A., Lakstygal, A.M., Krotova, N.A. et al. Understanding complex dynamics of behavioral, neurochemical and transcriptomic changes induced by prolonged chronic unpredictable stress in zebrafish. Sci Rep 10, 19981 (2020).

找实验方法，上脑声常谈

欢迎加入

动物模型构建与行为评估交流群

扫码邀请入群

方法检索教程